用聚合酶链反应研究乙型肝炎病毒的灭活

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建立测定乙肝病毒脱氧核糖核酸(HBVDNA)的聚合酶链反应-溴乙锭法(PCR-EB),该方法特异性好,灵敏度为1pgHBVDNA,已能检出HBV敏感动物黑猩猩的的最小感染量。应用PCR-EB法测定氯消毒剂对HBV的灭活作用表明,有效氯1250mg/L作用60分钟或2500mg/L作用30分钟可使10倍PCR灵敏度的纯化HVBDNA转阴;有效氯2500mg/L作用30分钟以上可使10倍PCR灵敏度的纯化Dane颗粒中HBVDNA转阴;有效氯625mg/L作用30分钟或1250mg/L作用10分钟可使10倍PCR灵敏度的纯化Dane颗粒上HBsAg转阴。因此认为,PCR用于评价氯消毒剂对HBV的灭活效果是可行的;HBVDNA作为HBV的灭活指标比HBV表面抗原更为直接可靠。 A polymerase chain reaction-ethidium bromide (PCR-EB) method for the determination of hepatitis B virus DNA (HBVDNA) was established. The method is specific and sensitive with a sensitivity of 1 pg HIBVDNA and has been able to detect minimal infection of chimpanzee in HBV-sensitive animals. PCR-EB method was used to determine the effect of chlorine disinfectant on HBV inactivation. The results showed that the effect of 1250 mg / L of available chlorine for 60 minutes or 2500 mg / L for 30 minutes could turn negative 10% of PCR-purified purified HVBDNA; More than 30 minutes of 10-fold PCR sensitivity of purified Dane particles HBVDNA negative; available chlorine 625mg / L for 30 minutes or 1250mg / L for 10 minutes can make 10 times PCR sensitivity of purified Dane particles HBsAg overcast. Therefore, it is feasible that PCR is used to evaluate the disinfection effect of chlorine disinfectant on HBV. HBVDNA is more direct and reliable than HBV surface antigen as an indicator of HBV inactivation.
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