灵芝转化体系的建立

• 作 者: 孙墨可 李晓薇 孙晓文 张曼 田娟 董玉迪 李海燕
• 机 构: 吉林省白城市农业科学院生物技术实验室,吉林农业大学生物反应器与药物开发教育部工程研究中心,吉林省镇赉县芦苇湿地管理站
• 出 处: 安徽农业科学
• 发表日期: 2018年26期
• 关键词: 灵芝 表达载体 PEG 转化 GFP Ganoderma lucidum Expression vector；PEG；Transformation；GFP
• 基金项目: 吉林省重点科技攻关项目（20150204027NY）.

利用TPS法提取平菇基因组,克隆甘油醛-3-磷酸脱氢酶启动子（glyceraldehyde-3-phosphate dehydrogenase,GPD）,用GPD启动子替换原表达载体p CAMBIA1302中的35s启动子,构建p CAMBIA1302表达载体,利用PEG法转化灵芝原生质体。通过酶切验证与测序结果表明GPD启动子已成功构建到表达载体p CAMBIA1302中,通过灵芝转化子的PCR检测和荧光显微镜观察证明绿色荧光蛋白（green fluorescent protein,GFP）已转入到灵芝