【摘 要】
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目的:将原核表达的多串重复人脑钠素蛋白裂解成单体.方法:利用高效表达质粒载体将串联5拷贝人脑钠素基因转入宿主菌E.coli M5219,以热诱导方式表达 5BNP融合蛋白,超声裂解收
【机 构】
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Biochemistry and Molecular Biology Department, Shantou University Medical College 515031
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目的:将原核表达的多串重复人脑钠素蛋白裂解成单体.方法:利用高效表达质粒载体将串联5拷贝人脑钠素基因转入宿主菌E.coli M5219,以热诱导方式表达 5BNP融合蛋白,超声裂解收获 5BNP融合蛋白包涵体,制备性电泳分离纯化;凝血酶消化后,再经BMPS-Skatole 法裂解.结果:利用本文原核表达系统所表达的5BNP融合蛋白占菌体总蛋白的30%,采用制备性电泳可获得纯度＞95%的5BNP融合蛋白;凝血酶消化后,再经BNPS-Skatole法可以将5BNP融合蛋白裂解成BNP单体.结论:BMPS-Skatole法是裂解多串重复人脑钠素蛋白的良好方法.
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