【摘 要】
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目的:利用质粒转染技术制备过表达迁移侵袭抑制蛋白(migration and invasion inhibitory protein,MIIP)的肾癌786-0/MIIP细胞系,观察MIIP对细胞增殖、侵袭及迁移能力的影响。
【机 构】
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安康市中心医院泌尿外科,第四军医大学西京医院泌尿外科,第四军医大学生物化学与分子生物学教研室
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目的:利用质粒转染技术制备过表达迁移侵袭抑制蛋白(migration and invasion inhibitory protein,MIIP)的肾癌786-0/MIIP细胞系,观察MIIP对细胞增殖、侵袭及迁移能力的影响。方法:构建携带MIIP基因的质粒,通过脂质体质粒转染技术上调肾癌786-0细胞系MIIP基因表达。Western-blot、Real-time PCR检测转染效果;利用MTT实验检测MIIP对786-0细胞增殖能力的影响;Transwell实验、划痕实验检测MIIP对786-0细胞侵袭、迁移能力的影响。结果:Western-blot、Real-time PCR检测发现实验组786-0/MIIP细胞MIIP蛋白及mRNA表达量有效上调。MTT实验显示实验组786-0/MIIP细胞增殖能力明显减弱(P<0.01)。Transwell实验显示实验组786-0/MIIP细胞侵袭能力减弱,穿透小室细胞数明显减少(P<0.01)。细胞划痕实验显示实验组786-0/MIIP细胞迁移能力显著下降(P<0.01)。结论:通过质粒转染技术能够制备过表达MIIP的肾癌细胞系。转染成功的肾癌786-0/MIIP细胞系MIIP表达量增加,有效抑制了肾癌细胞的增殖、侵袭与迁移。
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