镁通过L型钙通道α1C和β3亚基抑制高磷诱导的大鼠血管平滑肌细胞钙化

• 作 者: 白亚玲 徐金升 袁景霞 张俊霞 崔立文 张胜雷
• 机 构: 050011 石家庄，河北医科大学第四医院肾内科,050011 石家庄，河北医科大学第四医院肾内科,050011 石家庄，河北医科大学第四医院肾内科,050011 石家庄，河北医科大学第四医院肾内科,
• 出 处: 中华肾脏病杂志
• 发表日期: 2016年32期
• 关键词: 镁 肌细胞 平滑肌 钙质沉着症 钙通道 L型

目的

探讨L型钙通道（L-type calcium channel，LTCC）α_1C、β₃亚基在镁抑制高磷诱导的大鼠血管平滑肌细胞（VSMC）钙化中的作用。

方法

体外原代培养大鼠胸主动脉VSMC和血管环，用β-甘油磷酸盐（β-glycerophosphate，β-GP）诱导钙化。将细胞、血管环分别分为4组培养7 d：正常对照组、高磷组（10 mmol/L β-GP）、镁干扰组（10 mmol/L β-GP+3 mmol/L MgSO₄）、镁通道抑制剂（2-APB）组（10 mmol/L β-GP+3 mmol/L MgSO₄+0.1 mmol/L 2-APB）。采用茜素红染色、硝酸银染色分别检测各组VSMC、血管环的钙盐沉积情况，且用邻甲酚酞络合酮比色法检测钙含量。反转录PCR、Western印迹检测VSMC中LTCC α_1C、β₃亚基，Runx2的基因和蛋白表达。免疫组织化检测各组血管环中Runx2蛋白表达。ELISA测定VSMC碱性磷酸酶（ALP）活性，荧光探针法测定细胞内钙离子浓度。

结果

与正常对照组比较，高磷组VSMC钙含量，ALP活性，LTCCα_1C、LTCCβ₃和Runx2 mRNA和蛋白的表达，胞内钙离子浓度均增加（均P<0.05）；与高磷组比较，镁干扰组VSMC钙含量，ALP活性，LTCCα_1C、LTCCβ₃和Runx2 mRNA和蛋白的表达，钙离子浓度均降低（均P<0.05）。镁干扰组血管环组织钙含量和Runx2蛋白表达均低于高磷组（均P<0.05）。镁通道抑制剂组以上各项目与高磷组比较差异均无统计学意义。

结论

镁可以抑制高磷诱导的大鼠血管钙化，其可能是通过抑制LTCC α_1C和β₃亚基表达，阻滞VSMC钙离子内流，降低Runx2的表达，从而抑制VSMC发生表型转化实现的。