【摘 要】
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目的 通过体外培养骨关节炎(OA)软骨细胞体系,了解白藜芦醇对白细胞介素(IL)-1β诱导OA软骨细胞蛋白聚糖代谢的影响.方法 软骨细胞采自OA患者,采用分阶段酶消化法体外原代培
【机 构】
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西安交通大学医学院第一附属医院康复中心,陕西西安,710061
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目的 通过体外培养骨关节炎(OA)软骨细胞体系,了解白藜芦醇对白细胞介素(IL)-1β诱导OA软骨细胞蛋白聚糖代谢的影响.方法 软骨细胞采自OA患者,采用分阶段酶消化法体外原代培养人软骨细胞.在培养液中加入IL-1β诱导剂,设立兔血清对照组、实验对照组和白藜芦醇加药组；给予实验兔以白藜芦醇剂量灌胃后,抽取含药血清培养细胞.采用3种方法了解蛋白聚糖的代谢水平:1)用二甲基亚甲蓝分光光度法(DMMB法)检测细胞中及培养液中的糖安多糖(GAG)含量；2)酶联免疫吸附法检测培养液中蛋白聚糖的不同代谢片段(Mab-3B3和5D4)；3)反转录聚合酶链反应(RT-PCR)半定量法检测软骨细胞的蛋白聚糖、基质金属蛋白酶-1 (matrix metalLoproteinases,MMPs-1)和MMPs-3的mRNA表达水平.结果 各浓度白藜芦醇含药血清组体外培养的软骨细胞释放入培养液中GAG百分比均值明显低于对照组,两者相比差异有统计学意义(P＜0.01),随白藜芦醇的增加,释放入培养液中GAG的百分比逐渐降低；3B3含量的均值较对照组相比明显增高(P＜0.01),与白藜芦醇浓度呈正相关,释放入培养液中5D4含量的均值则明显降低(P＜0.05),与白藜芦醇浓度呈负相关；白藜芦醇可以增加OA患者软骨细胞和IL-1 β诱导的OA患者软骨细胞蛋白聚糖mRNA表达,减低MMPs-1、MMPs-3 mRNA的表达.结论 白藜芦醇可以抑制IL-1β对OA患者软骨细胞蛋白聚糖代谢的促进作用,达到保护软骨,防止OA的目的.
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