探讨重症急性胰腺炎(SAP)肺损伤大鼠肺组织内水通道蛋白-1(AQP-1)、核因子κB(NF-κB)的表达及意义。
方法采用实验研究方法。将48只Wistar大鼠采用随机数字表法分为SAP组和对照组，每组各24只。SAP组大鼠经胰胆管逆行注射5%牛磺胆酸钠(3 mL/kg)，术后适量补充生理盐水，构建SAP模型。对照组为相同方法注射生理盐水。两组干预后6、12、24、48 h分批处死大鼠，每个时相点6只。(1)采用免疫组织化学染色检测肺组织中AQP-1、NF-κB的表达。(2)采用RT-PCR检测AQP-1 mRNA的表达。(3)采用DNA断裂的原位末端标记(TUNEL)法检测肺组织细胞凋亡的变化。(4)常规HE染色后显微镜下观察肺组织损伤程度。正态分布的计量资料以
±s表示，组间比较采用方差分析。
(1)肺组织肉眼观察结果：SAP组大鼠肺组织表现为明显肺水肿，可见肺表面有散在出血点，不同时相点6、12、24、48 h肺脏损伤逐渐加重；对照组大鼠肺组织无明显病理学改变。(2)免疫组织化学染色结果显示：SAP组大鼠支气管黏膜上皮细胞、肺泡上皮细胞、浸润的中性粒细胞、单核巨噬细胞中AQP-1、NF-κB表达阳性；对照组大鼠肺组织中只有极少量肺泡间质细胞及肺上皮细胞表达NF-κB。不同时相点(6、12、24、48 h)SAP组大鼠肺组织的AQP-1阳性细胞率分别为5.4%±1.7%、6.4%±2.6%、6.3%±1.4%、6.3%±1.6%，对照组分别为28.1%±5.0%、31.2%±5.1%、30.1%±6.2%、29.7%±4.9%，两组比较，差异均有统计学意义(F＝27.52，23.89，22.85，22.43，P<0.05)。SAP组不同时间点大鼠肺组织NF-κB阳性细胞率分别为58.6%±5.0%、77.8%±5.2%、89.3%±4.8%、92.3%±6.8%；对照组分别为5.4%±1.7%、6.4%±2.6%、6.3%±1.4%、6.3%±1.6%，两组比较，差异均有统计学意义(F＝117.76，147.70，200.92，214.64，P<0.05)。(3)RT-PCR检测结果显示：不同时相点6、12、24、48 h SAP组大鼠AQP-1 mRNA相对表达量分别为14.17±0.18、3.56±0.22、2.87±0.21、1.51±0.12，6 h分别与12、24、48 h比较，差异均有统计学意义(F＝15.81，24.44，7.57，P<0.05)。12 h与24 h、12 h与48 h、24 h与48 h分别比较，差异均有统计学意义(F＝12.36，9.11，6.58，P<0.05)。(4)细胞凋亡检测及肺损伤程度观察：TUNEL检测结果显示：SAP组大鼠肺损伤组织中细胞凋亡主要分布于单核巨噬细胞、支气管黏膜上皮细胞、肺泡上皮细胞及少数血管内皮细胞；对照组大鼠肺组织内可见少量肺泡间质细胞和肺泡上皮细胞凋亡。SAP组大鼠6、12、24、48 h肺组织的细胞凋亡率分别为18.4%±5.0%、26.9%±5.1%、27.1%±4.2%、28.7%±3.8%；对照组分别为1.5%±0.7%、1.6%±0.6%、1.5%±0.4%、1.5%±0.6%，两组比较，差异均有统计学意义(F＝150.47，272.14，335.78，350.64，P<0.05)。SAP组大鼠肺组织12、24、48 h细胞凋亡率显著高于6 h(F＝10.25，10.42，11.63，P<0.05)。12 h与24 h、12 h与48 h、24 h与48 h分别比较，差异均有统计学意义(F＝7.22，8.89，7.75，P<0.05)。HE染色后显微镜下观察结果：SAP组随时间变化肺泡组织损伤逐渐加重，肺泡结构紊乱，Ⅱ型肺泡上皮细胞微绒毛减少，肺泡内出血，内皮细胞水肿，细胞间质水肿明显；对照组肺泡上皮细胞及血管内皮细胞结构基本正常。
结论SAP肺损伤组织中NF-κB的表达升高，而AQP-1表达降低，细胞凋亡呈时间依赖性。这表明SAP肺损伤中细胞凋亡发挥了重要作用，且NF-κB和AQP-1的异常表达在SAP肺损伤中具有重要意义。