探讨白细胞介素(IL)-6/转化生长因子-β(TGF-β)信号异常在桥本甲状腺炎(HT)辅助性T细胞17(Th17)/调节性T细胞(Treg)失衡中的作用。
方法HT患者38例，健康同年龄对照组32名。酶联免疫吸附试验检测血浆IL-6、TGF-β蛋白水平；荧光定量PCR检测CD4＋ T细胞视黄酸相关的孤儿受体γt(RORγt)、叉头蛋白P3(FOXP3)、Smad 3、Smad 4、转化生长因子-β诱导的早期反应基因1(TIEG1)、Itch、细胞因子信号抑制物(SOCS)1、SOCS3 mRNA表达；流式细胞术检测外周血CD4＋CD25＋FOXP3＋T细胞、CD4＋IL-17A＋ T细胞比例及CD4＋ T细胞表面转化生长因子-β受体Ⅱ(TGF-βRⅡ)、磷酸化的信号转导及转录活化因子3(pSTAT3)蛋白平均荧光强度；甲基化特异性定量PCR检测CD4＋ T细胞SOCS1基因外显子2、SOCS3基因5'端非翻译区(5'-UTR)3个可能的信号转导及转录活化因子3(STAT3)结合位点CpG岛甲基化水平。采用TGF-β或联合使用IL-6刺激正常人外周血CD4＋T细胞72 h后，分析IL-6/TGF-β信号对Th17/Treg细胞及SOCS1、SOCS3甲基化的影响。
结果(1)HT患者CD4＋IL-17A＋ T细胞比例及转录因子RORγt表达水平显著上调(P<0.05)，CD4＋CD25＋FOXP3＋ T细胞比例及FOXP3表达明显降低(P<0.05)，Th17/Treg比值高于正常对照组(P<0.05)。(2)与健康对照组比较，HT患者血浆IL-6浓度及CD4＋T细胞pSTAT3表达明显上调(P<0.05)，而TGF-β浓度及CD4＋ T细胞TGF-βⅡ及Smad 3、Smad 4、TIEG1、Itch mRNA表达显著降低(P<0.05)，且IL-6/TGF-β、Th17/Treg两者的比值呈正相关关系(P<0.05)。(3)HT患者CD4＋ T细胞SOCS1、SOCS3表达显著增加(P<0.05)，与其Th17/Treg比值呈负相关关系(P<0.05)；正常对照组SOCS1基因外显子2、SOCS3基因5'-UTR区第3个STAT3结合位点的CpG岛完全去甲基化，HT患者呈低甲基化状态(P<0.05), 其去甲基化水平与表达呈正相关关系(P<0.05)。两组SOCS3基因5'-UTR区第1、2个STAT3结合位点CpG岛均处于完全去甲基化状态(P>0.05)。(4)正常人外周血CD4＋ T细胞经TGF-β刺激后Treg细胞比例显著增高、Th17细胞及Th17/Treg比值均明显低于空白对照组(P<0.05)，而联合使用IL-6和TGF-β刺激后Treg细胞比例显著降低、Th17细胞及Th17/Treg细胞比值明显高于空白对照组(P<0.05)，各组细胞SOCS1基因外显子2、SOCS3基因5'-UTR区3个STAT3结合位点CpG岛均处于完全去甲基化状态(P>0.05)。
结论IL-6/TGF-β信号异常可能是HT患者Th17/Treg细胞失衡的因素之一。