【摘 要】
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目的 探讨微小RNA(miRNA)-3911对卵巢癌细胞增殖和迁移能力的影响及其作用机制.方法 实时定量聚合酶链式反应(qRT-PCR)检测卵巢癌细胞株(A2780、OC3、HO-8910、SKOV-3)及正常卵巢上皮细胞(IOSE80)中miR-3911的表达水平,选择miR-3911表达水平最低的卵巢癌细胞作为实验对象,分为两组:control组和miR-3911组,分别转染无意义序列NCmimic和miR-3911 mimic.qRT-PCR检测转染细胞中miR-3911的表达水平.采用CCK-8法
【机 构】
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山东大学附属山东省立第三医院妇产科,济南 250031;山东第一医科大学附属济南妇幼保健院妇产科
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目的 探讨微小RNA(miRNA)-3911对卵巢癌细胞增殖和迁移能力的影响及其作用机制.方法 实时定量聚合酶链式反应(qRT-PCR)检测卵巢癌细胞株(A2780、OC3、HO-8910、SKOV-3)及正常卵巢上皮细胞(IOSE80)中miR-3911的表达水平,选择miR-3911表达水平最低的卵巢癌细胞作为实验对象,分为两组:control组和miR-3911组,分别转染无意义序列NCmimic和miR-3911 mimic.qRT-PCR检测转染细胞中miR-3911的表达水平.采用CCK-8法和Transwell迁移实验分别检测miR-3911对卵巢癌细胞增殖和迁移能力的影响.通过靶基因预测网站microRA.org、PITA和miRTarBase预测miR-3911的靶基因,并采用双荧光素酶报告基因实验验证.qRT-PCR和Western blot检测转染细胞中miR-3911靶基因的表达水平.West-ern blot检测NF-κB信号通路蛋白NF-κB、p-IκBα、p-p65表达.结果 与IOSE80细胞相比,卵巢癌细胞株(A2780、OC3、HO-8910、SKOV-3)中miR-3911的表达水平显著降低(P<0.01),HO-8910细胞中miR-3911表达水平最低(P<0.01).与control组相比,miR-3911组HO-8910细胞增殖能力明显降低(P<0.05),迁移能力受到抑制(P<0.01).靶基因预测网站和双荧光素酶报告基因结果显示,NF-κB激活蛋白(NF-κB activating protein,NKAP)是miR-3911的靶基因(P<0.01).与control组比较,miR-3911组HO-8910细胞中NKAP基因表达水平显著降低(P<0.01),NF-κB信号通路蛋白NF-κB、p-IκBα、p-p65表达降低(P<0.01).结论 miR-3911在卵巢癌细胞株中呈低表达,miR-3911通过靶向负调控NKAP表达抑制NF-κB信号通路活化,降低卵巢癌HO-8910细胞的增殖和迁移能力.
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