【摘 要】
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目的 探讨长链非编码RNA(long non-coding RNA,lncRNA)DLGAP1-AS1对骨肉瘤细胞侵袭和细胞周期的影响及可能的机制.方法 采用基因表达谱交互式分析(Gene Expression Profiling Interactive Analysis,GEPIA)数据库分析DLGAP1-AS1表达水平与骨肉瘤患者生存率的关系.qRT-PCR检测骨肉瘤细胞Saos2、HOS、U-2OS、MG-63、143B及正常成骨细胞hFOB1.19中DLGAP1-AS1的表达.将HOS细胞分为DL
【机 构】
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青岛大学附属青岛妇女儿童医院骨科,青岛 266000;新沂市人民医院骨科
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目的 探讨长链非编码RNA(long non-coding RNA,lncRNA)DLGAP1-AS1对骨肉瘤细胞侵袭和细胞周期的影响及可能的机制.方法 采用基因表达谱交互式分析(Gene Expression Profiling Interactive Analysis,GEPIA)数据库分析DLGAP1-AS1表达水平与骨肉瘤患者生存率的关系.qRT-PCR检测骨肉瘤细胞Saos2、HOS、U-2OS、MG-63、143B及正常成骨细胞hFOB1.19中DLGAP1-AS1的表达.将HOS细胞分为DLGAP1-AS1组和control组,分别转染DLGAP1-AS1过表达载体和对照空载体.Transwell实验和流式细胞术检测骨肉瘤细胞侵袭和细胞周期.双荧光素酶报告基因系统验证DLGAP1-AS1与miR-744-3p的靶向关系.qRT-PCR检测miR-744-3p表达.qRT-PCR和Western blotting检测第10号染色体缺失的磷酸酶及张力蛋白同源基因(phosphatase and tensin homolog deleted on chromosome 10,PTEN)表达.结果 与DLGAP1-AS1表达水平较低的患者相比,DLGAP1-AS1表达水平较高的患者生存率较高(P<0.01).与hFOB1.19细胞相比,骨肉瘤细胞Saos2、HOS、U-2OS、MG-63、143B中DLGAP1-AS1表达水平均下降(P<0.05).与control组相比,DLGAP1-AS1组HOS细胞侵袭能力明显降低(P<0.01),细胞周期被抑制(P<0.01).DLGAP1-AS1靶向吸附miR-744-3p(P<0.01).与control组相比,DLGAP1-AS1组HOS细胞中miR-744-3p的表达明显降低(P<0.01),PTEN基因的表达明显增加(P<0.01).结论 DLGAP1-AS1在骨肉瘤细胞系中呈现低表达,DLGAP1-AS1通过吸附miR-744-3p促进PTEN基因表达,抑制骨肉瘤HOS细胞的侵袭和细胞周期,DLGAP1-AS1可能是骨肉瘤的潜在分子靶点.
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