磷脂酰肌醇3激酶抑制剂诱导猪卵巢颗粒细胞胰岛素抵抗的研究

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目的 观察磷脂酰肌醇3激酶(PI-3K)抑制剂--沃曼青霉素(wortmannin)诱导猪卵巢颗粒细胞胰岛素抵抗(IR)后,其信号传导通路中葡萄糖转运蛋白4(GLUT4)、丝裂原激活蛋白激酶(MAPK)基因表达的变化.方法 采用猪卵巢颗粒细胞体外培养,分别以浓度为0、1.0、1.5、3.0、5.0μmol/L的wortmannin作用48 h后,以氚标记葡萄糖法及葡萄糖氧化酶法检测细胞的葡萄糖消耗量,以免疫荧光法分析GLUT4、MAPK蛋白定位表达情况,以RT-PCR方法 对GLUT4、MAPK的mRNA进行半定量分析.结果 浓度为1.5 μmol/L的wortmannin降低细胞对葡萄糖的摄取量最高达40%(P<0.05),残余葡萄糖含量增多约13.76%,出现明显的IR.免疫荧光法结果 显示GLUF4、MAPK蛋白主要在细胞质表达.RT-PCR结果 提示,GLUT4基因表达水平降低21.06%,MAPK表达水平升高56.43%.结论 wortmannin可干扰细胞内的糖代谢信号传导通路,诱导IR的发生;同时可放大有丝分裂信号传导通路。

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