【摘 要】
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目的研究一种结合肿瘤基因治疗与病毒治疗优势的新型肿瘤治疗载体系统,即基因-病毒载体系统.方法利用病毒重组技术将抗癌基因插入肿瘤细胞特异性的增殖病毒的病毒基因组中,通
【机 构】
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第二军医大学东方肝胆外科医院病毒和基因治疗中心,香港大学临床肿瘤系
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目的研究一种结合肿瘤基因治疗与病毒治疗优势的新型肿瘤治疗载体系统,即基因-病毒载体系统.方法利用病毒重组技术将抗癌基因插入肿瘤细胞特异性的增殖病毒的病毒基因组中,通过细胞病理作用、荧光显微镜、免疫酶链技术及电镜等技术分别观察病毒的杀伤效应、报告基因绿色荧光蛋白、抗癌基因小鼠白细胞介素12表达量及病毒复制情况. 结果构建了一种新型基因-病毒载体系统,该载体系统腺病毒E1b 55 000蛋白缺失, 保留了腺病毒E1a蛋白.该载体系统具有肿瘤增殖病毒ONYX-015的相似功能, 即它可在肿瘤细胞内复制及增殖,而在正常细胞内不能复制及增殖,从而特异性杀灭肿瘤细胞.该载体系统还可携带各种抗癌基因以进一步提高抗肿瘤的疗效.应用该载体系统携带该报告基因绿色荧光蛋白可使绿色荧光蛋白在肿瘤细胞内高效表达, 其表达量明显高于传统基因治疗的腺病毒载体系,而在正常细胞内低表达, 表达量与传统腺病毒载体系统相似或更低.应用该载体系统携带抗癌基因小鼠白细胞介素12,也产生类似结果.电镜也证实该载体系统携带抗癌基因小鼠白细胞介素12可在肿瘤细胞株中复制及增殖.结论基因-病毒载体将抗癌基因插入肿瘤增殖病毒基因组,可数百倍乃至上万倍提高抗癌基因的表达量,进一步提高抗肿瘤的疗效.
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