【摘 要】
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目的:分析miR-19对PTEN及PI3K-Akt通路的调节作用,揭示miR-19和PTEN对子宫内膜癌KLE细胞侵袭、迁移的影响及其机制.方法:收集2017年5月至2020年8月河北医科大学第一医院收治的74例子宫内膜癌患者经手术切除(术前未接受放化疗等治疗)且病理确诊为子宫内膜癌的肿瘤组织及对应癌旁组织,采用qPCR和WB法检测PTEN在子宫内膜癌组织中的表达水平以及转染miR-19模拟物或抑制物对KLE细胞中PTEN表达的影响.通过TargetScan及双荧光素酶报告基因实验预测并验证PTEN是否为
【机 构】
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河北医科大学第一医院妇产科,河北石家庄050000
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目的:分析miR-19对PTEN及PI3K-Akt通路的调节作用,揭示miR-19和PTEN对子宫内膜癌KLE细胞侵袭、迁移的影响及其机制.方法:收集2017年5月至2020年8月河北医科大学第一医院收治的74例子宫内膜癌患者经手术切除(术前未接受放化疗等治疗)且病理确诊为子宫内膜癌的肿瘤组织及对应癌旁组织,采用qPCR和WB法检测PTEN在子宫内膜癌组织中的表达水平以及转染miR-19模拟物或抑制物对KLE细胞中PTEN表达的影响.通过TargetScan及双荧光素酶报告基因实验预测并验证PTEN是否为miR-19的靶基因,将KLE细胞随机分为对照(NC)组、miR-19模拟物组和miR-19+PTEN组,分别转染阴性对照片段(miR-NC)、miR-19模拟物或共转染miR-19模拟物+PTEN过表达载体,采用Transwell和细胞划痕实验检测miR-19和PTEN对KLE细胞迁移和侵袭能力的影响,WB法检测对PI3K-Akt通路相关蛋白表达的影响.结果:子宫内膜癌组织中PTEN的mRNA和蛋白表达水平均明显低于癌旁组织(均P＜0.01).miR-19能与PTENmRNA的3\'-UTR特异性结合,上调miR-19的表达能抑制PTEN的mRNA和蛋白的表达,下调miR-19的表达则出现相反的结果(均P＜0.01).与miR-NC组相比,miR-19模拟物组的迁移、侵袭细胞数以及划痕愈合率均显著升高(均P＜0.01),而miR-19+PTEN组的细胞迁移和侵袭能力以及划痕愈合率较miR-19摸拟物组则明显降低(均P＜0.01);与miR-NC组相比,miR-19模拟物组中PTEN蛋白的表达明显降低,而p-Akt 308和p-Akt 473蛋白的表达明显升高,Akt蛋白的表达无明显变化(均P＜0.01);而在miR-19+PTEN组中,p-Akt 308和p-Akt 473蛋白的表达均明显低于miR-19模拟物组(均P＜0.01).结论:miR-19可能通过抑制PTEN的表达从而活化PI3K-Akt通路,进而促进子宫内膜癌KLE细胞的迁移和侵袭.
其他文献
目的:探讨miR-496是否通过靶向mTOR影响宫颈癌HeLa细胞的周期、增殖、迁移、侵袭以及裸鼠移植瘤的生长.方法:选取2020年12月至2021年12月期间于河北医科大学第四医院接受手术的74例宫颈癌患者的肿瘤标本和癌旁组织标本,qPCR、WB法和免疫荧光法检测宫颈癌组织中miR-496和mTOR在mRNA和蛋白水平的表达.利用TargetScan数据库预测miR-496的靶基因并用双荧光素酶报告基因实验进行验证.将HeLa细胞按转染物不同分为对照组、miR-496 mimic组和miR-496 mi
目的:探讨miR-627-3p在食管鳞状细胞癌(esophageal squamous cell carcinoma,ESCC)组织中的表达及其对ESCC细胞生物学行为的影响.方法:收集2015年1月至2015年10月河北医科大学第四医院胸外科手术切除的ESCC组织86例及对应的癌旁组织标本20例.通过qPCR法检测miR-627-3p在86例ESCC组织及癌旁组织中的表达,分析其表达与ESCC患者临床病理学指标及预后的关系;利用Kaplan-Meier Plotter在线数据库进一步分析数据库中hsa-
目的:探索南蛇藤提取物齐墩果烷型五环三萜(28-hydroxy-3-oxoolean-12-en-2-oic acid)协同miR-451对人胃癌AGS细胞增殖、迁移的影响及其可能的分子机制.方法:用miR-451过表达慢病毒感染AGS细胞,并用盐酸多西环素(DOX)10或100 ng/ml诱导24 h,构建过表达miR-451的细胞AGS/miR-451+.采用10、20、40、80、160 μmol/L的齐墩果烷型五环三萜处理AGS/miR-451+细胞,MTT法、划痕实验分别检测细胞增殖和迁移能力的
目的:探讨miRNA let-7i-5p在肾细胞癌(renal cell carcinoma,RCC)组织中的表达水平及其对RCC细胞769-P的增殖、迁移、侵袭和透明质酸结合蛋白4 (hyaluronan-binding protein4,HABP4)表达的影响.方法:利用TCGA RCC数据库及GEO数据库对let-7i-5p在RCC组织中的表达进行meta分析.体外常规培养人RCC细胞769-P并对其进行转染,根据转染物不同分为过表达组(转染let-7i-5p模拟物)、抑制组(转染let-7i-5p
目的:探究miR-133a-5p调控血清外泌体源性纤连蛋白1(fibronectin1,FN1)的表达对胃贲门腺癌(gastric cardia adenocarcinoma,GCA)细胞增殖、黏附和M1型巨噬细胞极化的影响.方法:借助GEO数据库分析GCA组织中的差异表达基因,进行功能富集分析.采用qPCR检测FN1在GCA组织、血清、血清外泌体和细胞中的表达.向GCA患者血清外泌体中转染FN1的过表达载体及其对照质粒,向HGC-27细胞中转染miR-133a-5p模拟物及其对照,将转染后的HGC-27
目的:探讨F框蛋白2 (F-box only protein 2,FBXO2)基因在人胃癌细胞系中表达及其对胃癌细胞增殖、迁移、侵袭和EMT的影响.方法:选择胃癌细胞系MGC-803、AGS、SGC-7901、MKN-28以及正常胃黏膜上皮细胞株GES-1,qPCR法检测细胞中FBXO2 mRNA表达水平.设计靶向抑制FBXO2表达的特异siRNA,并瞬时转染MGC-803细胞,转染siRNA无义序列的为阴性对照.qPCR法检测转染48 h后MGC-803细胞中FBXO2 mRNA表达水平;用MTT法、细
目的:探讨穿膜蛋白125 (transmembrane protein 125,TMEM125)在肺腺癌组织与A549细胞中的表达,以及影响细胞的增殖和侵袭能力的分子机制.方法:从癌症基因组图谱(the cancer genome atlas,TCGA)数据库收集肺腺癌数据包,下载临床信息及基因表达谱数据.分析TMEM125在肺腺癌组织中的表达及其与患者总生存期的相关性.构建TMEM125过表达A549细胞株,以CCK-8法、细胞划痕实验检测TMEM 125过表达对肿瘤细胞的增殖和迁移能力的影响;流式细胞
调节性B细胞(Breg)是近年来新发现的B细胞功能型亚群,其通过分泌白细胞介素-10(IL-10)、白细胞介素-35(IL-35)和转化生长因子-β(TGF-β)等负向调节因子抑制机体免疫应答,在肿瘤免疫逃逸中发挥重要作用,影响肿瘤的发展、侵袭和转移.在肝癌、胃癌、乳腺癌、黑色素瘤、卵巢癌、肺癌等多种常见癌中均发现存在具有促癌效应的Breg.Breg和肿瘤的临床分期、治疗、预后存在一定的相关性.靶向Breg可能成为未来肿瘤免疫治疗的一个新方向.
目的:探究linc00941作为ceRNA吸附miR-203上调CC-趋化因子配体2(CC chemokine ligand 2,CCL2)的表达在食管鳞癌(esophageal squamous cell carcinoma,ESCC)中的作用机制.方法:选取南阳医学高等专科学校第一附属医院58例ESCC患者的癌组织和癌旁组织,其中,男性患者33例,年龄(49.3±18.6)岁,女性患者25例,年龄(44.6±20.7)岁.qPCR法检测linc00941、miR-203、CCL2在ESCC组织和4株人
RNA在多种生理和病理过程中起着至关重要的作用.在过去的几十年中,研究人员已经设计出多种类型的RNA及其衍生体,并应用于不同的生物学领域.研究证实,RNA分子在肿瘤的生长、转移、代谢和免疫逃逸等方面发挥着重要作用.基于肿瘤相关RNA的研究和相关技术的应用,RNA已经被设计应用于肿瘤免疫治疗之中.此外,作为肿瘤免疫治疗的工具,RNA可以与其他类型的免疫疗法结合使用,例如免疫检查点抑制剂、树突状细胞回输治疗以及嵌合抗原受体T细胞免疫疗法等.在综述中,论述了各种RNA工具(包括RNA适配体、mRNA疫苗和RNA