【摘 要】
：
目的 利用水痘-带状疱疹病毒(VZV)ORF9启动子的最短有效序列ORF9G和ORF61启动子的最短有效序列ORF61F构建VZV报告细胞系并分析其特性.方法 分别将ORF9G和ORF61F自身首尾连接
【机 构】
：
厦门大学医学院临床医学系,日本国立感染症研究所病毒一部
论文部分内容阅读
目的 利用水痘-带状疱疹病毒(VZV)ORF9启动子的最短有效序列ORF9G和ORF61启动子的最短有效序列ORF61F构建VZV报告细胞系并分析其特性.方法 分别将ORF9G和ORF61F自身首尾连接得到串联启动子T9G和T61F,再分别将T9G和T61F克隆到报告子质粒pGL3-basic中构建串联启动子-报告子重组质粒pGL-T9G和pGL-T61F,质粒中报告基因萤火虫荧光素酶的表达由上游串联启动子控制;将pGL-T9G、pGL-T61F分别同G418抗性质粒pCMV-script恒定转染到人黑色素瘤细胞系Mewo后培养至G418抗性细胞克隆生长;收集G418抗性细胞克隆,测定其感染VZV后萤火虫荧光素酶的表达强度,筛选信噪比高的细胞克隆作为VZV报告细胞系,并分析其灵敏度、特异性等主要特性.结果 串联启动子T9G和T61F分别较其单拷贝启动子9G和61F活性增加1倍;分别利用pGL-T9G和pGL-T61F成功构建了VZV报告细胞MV9G和MV61F;两个报告细胞在感染最低50 PFU VZV 24 h时即能检测到萤火虫荧光素酶的强表达,表达强度与感染病毒量呈线性正相关,但感染人巨细胞病毒(HCMV)、人类疱疹病毒6(HHV-6)和HHV-7时无表达;MV9G的灵敏度较MV61F略高.结论 MV9G和MV61F均可作为敏感、特异的VZV报告细胞系供进一步研究用.
其他文献
目的评价垸内钉螺孳生地全面综合治理消灭钉螺的效果。方法以环境改造为主,采用沟渠硬化、降滩建平台、沟渠扩洗、开新填旧、开挖鱼池、土埋等方法,辅以药物杀灭钉螺进行全面
目的 通过观察股骨头患者病例的临床影像学表现,评价核磁共振和CT在诊断股骨头坏死水平上的差异.方法 随机将所有患者分为两组,分别用核磁和CT进行检查.结果 通过CT检出股骨
目的 回顾性分析以脊柱侧凸为首诊的青少年不典型腰椎间盘突出症的临床特征及治疗策略.方法 自1998至2007年,共收治以脊柱侧凸为首诊的青少年腰椎间盘突出症患者19例,其中男
目的 比较两类凝血酶受体活化过程中蛋白激酶C(PKC)与钙离子(Ca2+)对血小板聚集率以及血小板膜表面活化标志物糖蛋白(GP)Ⅰ b表达的影响,探讨G蛋白q(Gq)信号途径在凝血酶受体
目的探讨癫癎患者认知功能障碍及其影响因素。方法采用韦氏儿童智力量表及成人智力量表对125例癫癎患者的认知功能进行测定,并分析年龄、发作类型、癫癎综合征类型、病因、发
目的：探讨中医辨证治疗偏头痛的临床疗效。方法选择我科室诊治的136例偏头痛患者，随机分为观察组与对照组各68例，对照组给予中成药正天丸，观察组给予中医辨证治疗，对两组治疗的疗
目的 研究银杏叶提取物(EGb)对托吡酯(TPM)引起的发育期癫(癎)大鼠学习记忆功能损害的影响.方法 在徐州医学院实验动物中心对28日龄SD大鼠32只,经初筛后随机分为4组,每组8只,
目前,全世界有五分之一的人超重或患肥胖症,因此,采取一定的防范措施非常重要.国家体重控制登记中心记载了减肥成功者的减肥方法.
目的 观察不同的肺热缺血时间及肺灌注方法对猪自体肺叶移植术后氧自由基水平、细胞因子的影响,探讨其机制.方法 本地健康杂种猪36头,随机分为6组,各组均经不同时间热缺血及
目的 探讨PET/CT对头颈部肿瘤放射治疗计划的作用.方法 16例头颈部肿瘤患者行PET/CT和定位CT检查,根据检查结果对16例患者进行TNM分期,比较其分期结果.将定位CT图像传入三维