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本研究以中国古老月季新鲜幼叶为试材,进行RAPD分子标记反应扩增体系的优化.对RAPD-PCR反应结果影响较大的五个因素(模板DNA的浓度,引物的浓度,MgCl2的浓度,dNTP的浓度,Taq DNA聚合酶的浓度)进行了单因素多水平设计.结果表明:20 μL总反应体积中含模板DNA (10 ng/μL) 1.0 μL、dNTP(2.5 mmol/L) 1.6 μL、引物(2.0 μmol/L) 1.5 μL、MgCl2 (25 mmol/L) 1.6 μL、TaqDNA聚合酶(5 U/μL) 0.3 μL、10×Buffer用量2.0 μL,其余用去离子水补充.通过优化后的RAPD-PCR反应体系可获得清晰、稳定、条带多的电泳图,表明以上反应条件适合中国古老月季RAPD分子标记反应的体系.该体系的建立有利于中国古老月季的亲缘关系和遗传多样性分析.