【摘 要】
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目的: 构建人源性大肠癌抗原cDNA噬菌体表达文库. 方法: 从人大肠癌组织中提取总RNA,纯化mRNA,用RT-PCR反转录合成cDNA第一链,用LD-PCR合成cDNA第二链,除去小于500 bp的小片
【机 构】
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第一军医大学南方医院全军消化内科研究所
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目的: 构建人源性大肠癌抗原cDNA噬菌体表达文库. 方法: 从人大肠癌组织中提取总RNA,纯化mRNA,用RT-PCR反转录合成cDNA第一链,用LD-PCR合成cDNA第二链,除去小于500 bp的小片段,与去磷酸化的λTriplEx2噬菌体连接,体外包装. 转染E.coli XL1-Blue大肠杆菌,滴定文库的滴度,确定文库容量大小,用ITPG和X-gal测定重组率. 用SfiⅠ酶切鉴定插入的cDNA片段大小. 结果: 构建成含2.39×106重组子的人大肠癌抗原cDNA噬菌体表达文库,重
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