【摘 要】
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目的:探讨黄芪甲苷(AS-Ⅳ)抑制转化生长因子β1(TGF-β1)诱导肾小管上皮细胞凋亡的机制.方法:体外采用TGF-β1(10 ng/ml)刺激人近端小管上皮细胞(HK-2),采用不同浓度的AS-Ⅳ(
【机 构】
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上海交通大学医学院附属仁济医院肾脏科,分子细胞(肾病)实验室,上海,200127南京军区福州总医院肾内科;
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目的:探讨黄芪甲苷(AS-Ⅳ)抑制转化生长因子β1(TGF-β1)诱导肾小管上皮细胞凋亡的机制.方法:体外采用TGF-β1(10 ng/ml)刺激人近端小管上皮细胞(HK-2),采用不同浓度的AS-Ⅳ(50 μg/ml、100μg/ml、200μg/ml)进行干预治疗24h收集细胞.体内建立小鼠单侧输尿管梗阻(uuO)模型,C57BL/6小鼠随机分为假手术组(Sham组)、模型组(UUO组)和治疗组(AS-Ⅳ组).采用单侧(右)输尿管结扎建立UUO模型,Sham组仅游离输尿管但不结扎,AS-Ⅳ组连续7天给予AS-Ⅳ[20 mg/(kg·d)]灌胃,UUO组和Sham给予等剂量溶剂灌胃,术后第14天采集肾脏组织.TUNEL法检测凋亡,CCK法观察细胞活性,Western印迹检测TGF-β1和被切割的半胱氨酸蛋白酶3(cleaved-caspase 3)表达,并观察c-Jun氨基末端激酶(JNK)丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)磷酸化情况. 结果:AS-Ⅳ改善UUO诱导的肾组织TGF-β1表达及细胞凋亡(P＜0.01),抑制TGF-β1诱导的HK-2细胞活性下降及细胞凋亡,200 μg/ml AS-Ⅳ作用最明显(P＜0.01).体内体外实验均可见,AS-Ⅳ减少caspase 3活化,抑制JNK MAPK磷酸化. 结论:AS-Ⅳ可抑制TGF-β1的表达及其诱导的肾小管上皮细胞凋亡,其机制可能与JNKMAPK通路有关.
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