【摘 要】
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为了探讨肿瘤抑制基因——MTSl/p16 CDK4在人肿瘤细胞中的改变及其对肿瘤细胞恶性转化的影响,采用 DNA 重组技术构建了突变型 p16基因重组质粒作为 DNA 探针,用于检测 p16基
【机 构】
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为了探讨肿瘤抑制基因——MTSl/p16 CDK4在人肿瘤细胞中的改变及其对肿瘤细胞恶性转化的影响,采用 DNA 重组技术构建了突变型 p16基因重组质粒作为 DNA 探针,用于检测 p16基因的缺失。结果表明,从人恶性黑色素瘤细胞系(Bowes 细胞)中获得的 p16基因第二外显子(exon 2)DNA 片段长度为480bp,DNA 序列测定证实其第341号核苷酸发生点突变(T/C 颠换)。从该重组质粒中提取的 p16基因 exon2 DNA 片段经核素[~32P]标记后,应用于40例卵巢癌石蜡标本 DNA 样品的 p16基因检测,检出3例 p16基因缺失的病例,检测结果明确,其敏感性达到可以检测0.3pg 同源 DNA。结论:该重组质粒含有0.5Kb 的 p16基因 exon 2 DNA片段,可以作为基因探针检测肿瘤组织中 p16基因的缺失。
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