【摘 要】
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白粉病是橡胶树的主要病害之一,为阐明橡胶树与白粉菌分子互作机制,本研究基于已报道的负调控基因LFG为基础,克隆出橡胶树中同源基因LFG1和LFG2,采用同源克隆方法,以橡胶树基
【机 构】
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海南大学热带农林学院,热带农林生物灾害绿色防控教育部重点实验室,海口,570228
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白粉病是橡胶树的主要病害之一,为阐明橡胶树与白粉菌分子互作机制,本研究基于已报道的负调控基因LFG为基础,克隆出橡胶树中同源基因LFG1和LFG2,采用同源克隆方法,以橡胶树基因组DNA和cDNA为模板,PCR扩增HbLFG1和HbLFG2基因;利用生物信息学方法分析该基因及其同源蛋白;并分别对白粉菌侵染不同时间和不同病害等级的橡胶树叶片进行RT-PCR测定,检测HbLFG1和HbLFG2的基因表达量.HbLFG1和HbLFG2基因的核酸和氨基酸分析结果分别为:cDNA序列全长均为729 bp及由242个氨基酸编码组成,蛋白的分子量为27.220 kD和27.248 kD,等电点为8.24和8.63,正负电荷残基数为15和12与13和11,脂肪系数是132.52和130.50,不稳定系数为24.19和26.51,总平均亲水性0.958和1.011.两个基因都有7个跨膜结构域,不含有信号肽,蛋白都属于BI-1家族,蛋白模序有5处差异,两个基因与辣椒和柑橘的BI1-like蛋白同源性最为接近.HbLFG1随白粉菌侵染时间和病害等级的增加均呈现先上升后下降的趋势;HbLFG2随病害等级的上升呈现先上升后下降的趋势,但是随白粉菌侵染时间的增加呈现持续上升的趋势.HbLFG1和HbLFG2两个基因的表达量都与橡胶树白粉菌的侵染有关,但两者存在一定差异.本研究有助于深入阐释橡胶树与白粉菌分子互作机制.
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