【摘 要】
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目的 构建Toll样受体（TLR）4基因慢病毒表达载体介导的小干扰RNA（siRNA）,观察其对大鼠肺泡巨噬细胞NR8383 TLR4的沉默效应。方法 设计4条针对TLR4基因的siRNA靶序列,经合成、退火
【机 构】
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山东大学附属省立医院中医科,山东大学公共卫生学院
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目的 构建Toll样受体（TLR）4基因慢病毒表达载体介导的小干扰RNA（siRNA）,观察其对大鼠肺泡巨噬细胞NR8383 TLR4的沉默效应。方法 设计4条针对TLR4基因的siRNA靶序列,经合成、退火、酶切,与线性载体GV115连接,转入细菌感受态细胞,经聚合酶链反应（PCR）筛选阳性克隆、测序鉴定。共转染293T细胞,包装产生慢病毒颗粒,分别感染NR8383细胞,实时定量PCR（RT-PCR）检测NR8383细胞TLR4 mRNA的表达。根据筛选结果,选取最有效的载体进行病毒大量包装。结果 经测
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