鸡白细胞介素18成熟蛋白的原核表达及抗体间接ELISA方法的建立

• 作 者: 苏倩倩 李恩扩 张海滨 周霞 胡敬东
• 机 构: 山东农业大学动物医学院／山东省动物生物技术与疫病防治重点实验室
• 出 处: 山东农业科学
• 发表日期: 2012年4期
• 关键词: 鸡白细胞介素 18成熟蛋白(mChIL-18) 原核表达 蛋白纯化 间接ELISA Chicken interleukin 18 mature protein
• 基金项目: 基金项目：山东省优秀中青年科学家科研奖励基金（2006BS06015）、山东省自然科学基金（Y2008D12）资助

将鸡白细胞介素18的成熟蛋白（chicken interleukin 18 mature protein，mChIL-18）基因在原核系统表达，采用Ni—NTA亲和层析方法纯化得到该重组蛋白。纯化后重组蛋白包被反应板，通过方阵滴定确定最佳抗原包被浓度、血清稀释倍数、羊抗鼠酶标二抗稀释倍数，建立检测ChIL—18成熟蛋白抗体的间接ELISA方法。经方阵滴定结果确定最佳抗原包被质量浓度为4μ／ml，阳性血清稀释比例为1：10^4，羊抗鼠IgG辣根过氧化物酶结合物最佳稀释比例为1：12000，抗原抗体最佳结合时