【摘 要】
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目的 观察血卟啉单甲醚(hematoporphyrin monomethyl ether,HMME)-光动力学疗法(photodynamic therapy,PDT)对增生性瘢痕成纤维细胞(hypertrophic scar fibroblast,HSF)中细
【机 构】
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解放军空军总医院皮肤科 北京市,100141;解放军总医院激光医学科
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目的 观察血卟啉单甲醚(hematoporphyrin monomethyl ether,HMME)-光动力学疗法(photodynamic therapy,PDT)对增生性瘢痕成纤维细胞(hypertrophic scar fibroblast,HSF)中细胞色素C( cytochrome C,Cyc)表达的影响.方法 采用组织块法原代培养瘢痕组织来源的成纤维细胞,建立HSF的传代细胞系,实验用第4～6代细胞.取对数生长期的HSF细胞,分为对照组和HMME-PDT组,其中HMME-PDT组的处理方法为培养的HSF与4μg/ml的HMME避光孵育3h,PDT治疗采用波长为630 nm的激光,功率密度10 mW/cm2,能量密度2.5 J/cm2,两组细胞爬片细胞经固定、打孔后加入Cyc(1∶50)抗体以及FITC标记的二抗(1∶100),荧光显微镜下观察Cyc的荧光强度.用PI单染后经FCM检测细胞凋亡率.每标本计数105个细胞,实验重复5次.结果 对照组HSF的细胞浆中Cyc-FITC荧光微弱,PDT组荧光显著增强；PI染色分析表明对照组凋亡率低(2.45±0.22％),PDT组的凋亡率显著升高(30.54 ±3.78％),二者相比差异有显著意义(P＜0.05).结论 光动力治疗后导致的线粒体功能障碍可能在瘢痕成纤维细胞凋亡中发挥了重要作用.
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