【摘 要】
：
目的 利用制备的抗人肿瘤血管内皮标志物-7(TEM7)单克隆抗体通过免疫组织化学的方法,检测TEM7蛋白在不同来源的肿瘤组织中的定位,为以TEM7为靶标的肿瘤血管导向治疗提供必要的理论基础. 方法利用PCR的方法,将TEM7膜外段重组到原核表达载体pET-32b中,在大肠杆菌中表达,蛋白经离子吸附层析纯化后免疫雌性BALB/c小鼠,传统的杂交瘤融合技术制备鼠抗人TEM7膜外段单克隆抗体.以酶联免疫
【机 构】
：
200032,上海,复旦大学上海医学院病理学系,200032,上海,复旦大学上海医学院病理学系,200032,上海,复旦大学上海医学院病理学系,200032,上海,复旦大学上海医学院病理学系,2000
论文部分内容阅读
目的 利用制备的抗人肿瘤血管内皮标志物-7(TEM7)单克隆抗体通过免疫组织化学的方法,检测TEM7蛋白在不同来源的肿瘤组织中的定位,为以TEM7为靶标的肿瘤血管导向治疗提供必要的理论基础. 方法利用PCR的方法,将TEM7膜外段重组到原核表达载体pET-32b中,在大肠杆菌中表达,蛋白经离子吸附层析纯化后免疫雌性BALB/c小鼠,传统的杂交瘤融合技术制备鼠抗人TEM7膜外段单克隆抗体.以酶联免疫吸附实验(ELISA)、Western blot筛选及鉴定分泌特异性抗人TEM7膜外段单克隆抗体的杂交瘤细胞株. 最后采用免疫组织化学ABC的方法,分别对不同来源的70例肿瘤组织及癌旁正常组织进行了TEM7蛋白定位的研究. 结果制备了抗人TEM7单克隆抗体,经过Western blot鉴定具有高度的特异性.对肿瘤及癌旁正常组织免疫组织化学ABC染色的结果可见TEM7蛋白定位于:大肠癌、胃癌、乳腺癌、肺癌、肝细胞癌、肾细胞癌和前列腺癌的血管内皮细胞;大肠癌、胃癌、乳腺癌、肺癌和肝细胞癌的肿瘤细胞;大肠癌、胃癌和乳腺癌的血管平滑肌细胞;胃癌的胃壁平滑肌细胞;肝细胞癌的胆管上皮细胞. 结论成功制备了特异性抗人TEM7膜外段的单克隆抗体;TEM7在肿瘤组织中并非特异性地表达于肿瘤血管内皮细胞,还可见于肿瘤组织的癌细胞、血管平滑肌细胞中,甚至在正常组织中也有表达.提示,在寻找以肿瘤血管内皮细胞为靶标的标志物时,直接寻找蛋白标志物可能是更为有效、可靠的方法。
其他文献
目的 探讨通过拉米夫定和干扰素单一或联合使用观察其抗病毒效果和对拉米夫定致停药后反跳及治疗中耐药突变的影响,寻找疗效好、费用低的治疗方法. 方法应用前瞻性随机分组方法,对150例未经治疗的乙型肝炎病毒(HBV)患者进行治疗.实验分5组,每组30例,A组(新联合疗法):前3个月使用拉米夫定100 mg/d,第4个月时加用干扰素α,每次3MU,每周3次至疗程结束,但第10个月时将拉米夫定减为100 m
目的 观察窒息新生儿免疫功能及 β 内啡肽 (β EP)的动态变化。 方法 2 0 0 1年 10月至 2 0 0 2年 10月选择广东省肇庆市第一医院儿科住院窒息新生儿 81例和同期健康新生
目的通过前稀释持续静脉-静脉血液滤过(CVVH)治疗的体外实验,研究血流量和超滤率在前稀释模式CVVH时对溶质清除的影响.方法建立等容、前稀释CVVH体外实验装置,置换液流量(Qs)
目的 用流式细胞仪测定高血压病人服用丹芎通脉颗粒前后血小板活化水平。方法 在服药前后,采用双注射器采集外周静脉血,3 8％枸掾酸钠抗凝,加入三种荧光素标记的单克隆抗体。分
目的 探讨急性无Q波心肌梗死(ANQMI)和急性Q波心肌梗死(AQMI)在发病最初6 h内冠状动脉病变的性质、血栓及侧支循环形成情况的不同,为进一步治疗提供理论基础.方法对52例ANQMI患者和130例AQMI患者在发病6 h内进行选择性冠状动脉造影,比较两组在冠状动脉造影所见中的不同特点,并对他们的发病年龄、临床症状、心肌酶变化特点等情况进行.结果与AQMI比较,ANQMI发病年龄较高,临床中常
目的 探讨人巨细胞病毒(HCMV)主要基因序列表达情况对其感染结局的影响. 方法采用不同滴度HCMV感染传代培养的人胚肺成纤维细胞,建立HCMV梯度感染细胞模型.分别应用FQ-PCR法测定感染细胞内IE基因拷贝数、免疫组化法联合计算机病理图文分析系统检测p52蛋白表达水平以及RT-PCR法测定MCPmRNA转录水平,光镜观察致细胞病变作用(CPE)、电镜检查细胞超微结构改变. 结果 IE基因在病毒
目的:评估虚拟X线影像导航在颈椎内固定手术的作用.方法:对12例需行颈椎内固定手术的患者采用虚拟X线导航引导下置入内固定物,其中,齿状突螺钉2例;C1-2关节突螺钉(双侧)2例;C
目的 研究社区老年人和轻中度痴呆患者神经精神症状的表现及其患病率.方法采用国际通用的神经精神科问卷(NPI)对北京市城乡1540名认知功能正常的65岁及其以上老年人和373名痴呆患者的神经精神症状进行了调查.结果痴呆患者中49.33%在近一个月内出现过至少一种神经精神症状(35.66%为临床显著性症状),其中80.4%出现2种以上的神经精神症状.痴呆患者最常见的症状包括抑郁/心境恶劣(23.86%
目的 总结球囊扩张及支架治疗布加综合征(Budd-Chiari syndrome,BCS)的经验.方法对312例BCS患者行下腔静脉(inferior vena cava,IVC)造影,确定病变部位、类型,再用导丝硬头或穿刺针穿通阻塞部位、球囊扩张、内置支架.结果本组312例,扩张成功271例,其中IVC 260例,肝静脉(hepatic vein,HV)11例,放置IVC支架195例,HV支架1
目的 研究颈椎椎间盘对终板结构生物力学特性的影响.方法 50节颈椎标本,采用Nachemson椎间盘分级标准将标本分为4组,正常组(n=22)、Ⅰ度退变组(n=10)、Ⅱ度退变组(n=9)、Ⅲ度退变组(n=9),对每一终板平面上20个特定的测试点进行压缩实验,直径2 mm的半球形压头以0.03 mm/s的速度垂直于终板平面下压2 mm,由所得的力─位移曲线计算出最大压缩力及刚度,采用单因素方差分析