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摘要 为明确戊唑醇对2种辣椒炭疽菌的敏感性差异，通过菌丝生长速率法测定了戊唑醇对2种辣椒炭疽菌的室内抑菌效果。结果表明，戊唑醇对5株不同地点平头炭疽菌的EC50值分别为187.157 4、22.189 4、82.057 5、54.537 9和28.363 5 μg/mL，对3株不同地点的斯高威尔炭疽菌的EC50值分别为0.298 0、0.340 4和0.240 4 μg/mL。戊唑醇对斯高威尔炭疽菌敏感而对平头炭疽菌表现为不敏感。准确鉴定出辣椒炭疽病病原种类，筛选出对病原菌敏感的化学药剂，为进一步科学防治辣椒炭疽病提供理论依据。
关键词 戊唑醇; 尖孢炭疽; 平头炭疽;抑菌效果;敏感性
Abstract In order to define the inhibitory effect of tebuconazole against C.scovillei and C.truncatum， tebuconazole against the pathogen by the method of mycelium growth rate in the laboratary were determined.The results indicated that EC50 of tebuconazole against the growth of mycelium of five C.truncatum strains were 187.157 4，22.189 4，82.057 5，54.537 9 and 28.363 5 μg/mL respectively，but tebuconazole had good inhibitory effect on the growth of mycelium of three C.scovillei strains，which EC50 were 0.298 0、0.340 4 and 0.240 4 μg/mL respectively.Therefore，tebuconazole was sensitive to C.scovillei，but was not sensitive to C.truncatum.The species of the pathogen of pepper anthracnose should be identified and effective fungicides against the disease should be screened，and it could provide theoretical basis for controlling the disease.
Key words Tebuconazole;Colletotrichum scovillei;Colletotrichum truncatum;Inhibitory effect;Sensitivity
辣椒炭疽病是由炭疽菌属（Colletotrichum spp.）真菌所引起，主要为害辣椒果实，严重影响辣椒的产量和质量。据调查，辣椒炭疽病在天津各辣椒种植区均有发生，尤以2016年天津市宁河区辣椒主产区发生最为严重，一般地块减产50%，重病地块减产80%以上甚至绝收。该病已严重影响当地辣椒产业的发展。据报道，引起辣椒炭疽病的病原至少有24种，包括胶孢炭疽菌（Colletotrichum gloeosporioides）、黑点炭疽菌（C.capsici）、黑色炭疽菌（C.coccodes）、壳皮炭疽菌（C.crassipes （Speg.）Arx）、博宁炭疽菌（C.boninense）、平头炭疽菌（C.trnucatum）、君子兰炭疽菌（C.cliviae）、喀斯特炭疽菌（C.karstii）、菠菜炭疽菌（C.spinaciae）、C.fructicola、C.brevispora、C.liriopes、C.godetiae、C.salicis和斯高威尔炭疽菌（C.scovillei）等[1-6]。据笔者鉴定，天津地区辣椒炭疽病的病原主要为C.truncatum和C.scovillei（未发表）。
C.scovillei引起的辣椒炭疽病在我国是由Liu等[7]在四川辣椒果实上首次发现，之后在我国不同地区陆续被报道[6，8]，笔者通过试验证实C.scovillei对辣椒果实的致病力较强，测定了戊唑醇对C.truncatum和C.scovillei的室内抑菌效果，明确了其敏感性差异，旨在为有效防治辣椒炭疽病提供理論依据。
1 材料与方法
1.1 试验材料
1.1.1 供试药剂 。97%戊唑醇（tebuconazole）原药，沈阳科创化学品有限公司。
1.1.2 供试菌株 。 菌株CA1、CA2、CA3均为斯高威尔炭疽菌（Colletotrichum scovillei），采集地点分别为宁河区板桥镇、武清区豆张庄镇和西青区第六阜镇;菌株CT1、CT2、CT3、CT4和CT5均为平头炭疽菌（C.truncatum），采集地点分别为宁河区板桥镇、武清区豆张庄镇、武清区大碱厂镇、武清区西王庄镇和西青区第六阜镇。所有菌株均来自于天津市植物保护研究所蔬菜病害研究室。
1.2 试验方法 采用菌丝生长速率法[9]测定戊唑醇对辣椒炭疽病菌的抑菌率。供试药剂先用少量二甲基甲酰胺溶解，然后用水溶解稀释，根据药剂活性，将药剂的质量浓度分别设置为200、100、50、10、1、0.1 μg/mL;在无菌操作下，根据试验处理吸取预先融化的灭菌培养基36 mL加入到无菌50 mL三角瓶中，从低浓度到高浓度依次吸取4 mL药液，分别加入上述三角瓶中，充分摇匀。然后等量倒入3个培养皿中（直径为9 cm），制成相应浓度的含药平板。设不含药剂的处理作为空白对照，每个处理3个重复。 将培养好的病原菌，在无菌条件下用灭菌打孔器（直径为3 mm）在菌落边缘切取菌饼，用接种器将菌饼接种于含药平板中央，菌丝面朝上，盖上皿盖，置于25 ℃培养箱中培养7 d后，用卡尺测量菌落直径，每个菌落用十字交叉法垂直测量直径各1次，取其平均值，试验设3个重复，计算各药剂对辣椒炭疽病菌的抑菌率 。抑菌率= （空白对照菌落半径-药剂处理菌落半径 ）/空白对照菌落半径×100%。
1.3 数据分析 利用SPSS 19.0软件对试验数据进行分析。
2 结果与分析
由表1可知，戊唑醇对5株不同来源的C.truncatum菌株的EC50值在22.189 4～187.157 4 μg/mL，EC50值最小的菌株来源于武清区豆张庄镇，为22.189 4 μg/mL，这说明C.truncatum很可能对戊唑醇不敏感。由表2可知，戊唑醇对3株不同来源的C.scovillei菌株的EC50值在0.240 4～0.298 0 μg/mL，各EC50值差距很小，说明C.scovillei很可能对戊唑醇敏感。
3 结论与讨论
该研究证实3株不同地点的C.scovillei对戊唑醇均表现为敏感，而5株不同地点的C.truncatum对戊唑醇均表现为不敏感。研究表明，不同种类辣椒炭疽菌对同一药剂的敏感性存在较大差异[10]。因此对于辣椒炭疽病的田间防治，应明确辣椒炭疽病病原，若病原单纯由C.scovillei侵染，可以用戊唑醇进行防治，若病原单纯为C.truncatum，应避免应用戊唑醇进行炭疽病的防治。当炭疽菌混合侵染时，可以选择对不同种类辣椒炭疽菌均敏感的药剂或含有戊唑醇的复配药剂进行防治，以达到更好的防治效果。
参考文献
[1] 杨友联.中国贵州、云南、广西炭疽菌属真菌多基因分子系统学研究[D].武汉：华中农业大学，2010.
[2] 王薇.苹果炭疽叶枯病病原学及苹果炭疽病侵染来源研究[D].杨凌：西北农林科技大学，2017.
[3] 杨佳文，赵尊练，张管曲，等.陕西线辣椒炭疽病原菌的鉴定及生物学特性研究[J].西北农业学院，2017，26（11）： 1695-1705.
[4] DE SILVA D D，GROENEWALD J Z，CROUS P W，et al.Identification，prevalence and pathogenicity of Colletotrichum species causing anthracnose of Capsicum annuum in Asia[J].IMA Fungus，2019，10：1-32.
[5] MONGKOLPORN O，TAYLOR P.Chili anthracnose： Colletotrichum taxonomy and pathogenicity[J].Plant pathology，2018，67（6）：1255-1263.
[6] DIAO Y Z，ZHANG C，LIU F，et al.Colletotrichum species causing anthracnose disease of chili in China[J].Persoonia，2017，38：20-37.
[7] LIU F L，TANG G T，ZHENG X J，et al.Molecular and phenotypic characterization of Colletotrichum species associated with anthracnose disease in peppers from Sichuan Province，China[J].Scientific Reports，2016，6（1）：147-182.
[8] GAO Y Y，HE L F，LI B X，et al.The potential of fludioxonil for anthracnose control on China chili fruit[J].Phytoparasitica，2017，45（3）：281-292.
[9] 朱春雨，吳新平，徐文平，等.中华人民共和国农业行业标准（农药室内生物测定试验准则 杀菌剂 第2部分：抑制病原真菌菌丝生长试验 平皿法：NY/T 1156.2—2006[S].北京：中国农业出版社，2006.
[10] 满益龙，谭新球，司乃国，等.不同辣椒炭疽病菌对唑菌酯的敏感性差异[J].植物保护，2016，42（5）：171-176.
关键词 戊唑醇; 尖孢炭疽; 平头炭疽;抑菌效果;敏感性
Abstract In order to define the inhibitory effect of tebuconazole against C.scovillei and C.truncatum， tebuconazole against the pathogen by the method of mycelium growth rate in the laboratary were determined.The results indicated that EC50 of tebuconazole against the growth of mycelium of five C.truncatum strains were 187.157 4，22.189 4，82.057 5，54.537 9 and 28.363 5 μg/mL respectively，but tebuconazole had good inhibitory effect on the growth of mycelium of three C.scovillei strains，which EC50 were 0.298 0、0.340 4 and 0.240 4 μg/mL respectively.Therefore，tebuconazole was sensitive to C.scovillei，but was not sensitive to C.truncatum.The species of the pathogen of pepper anthracnose should be identified and effective fungicides against the disease should be screened，and it could provide theoretical basis for controlling the disease.
Key words Tebuconazole;Colletotrichum scovillei;Colletotrichum truncatum;Inhibitory effect;Sensitivity
辣椒炭疽病是由炭疽菌属（Colletotrichum spp.）真菌所引起，主要为害辣椒果实，严重影响辣椒的产量和质量。据调查，辣椒炭疽病在天津各辣椒种植区均有发生，尤以2016年天津市宁河区辣椒主产区发生最为严重，一般地块减产50%，重病地块减产80%以上甚至绝收。该病已严重影响当地辣椒产业的发展。据报道，引起辣椒炭疽病的病原至少有24种，包括胶孢炭疽菌（Colletotrichum gloeosporioides）、黑点炭疽菌（C.capsici）、黑色炭疽菌（C.coccodes）、壳皮炭疽菌（C.crassipes （Speg.）Arx）、博宁炭疽菌（C.boninense）、平头炭疽菌（C.trnucatum）、君子兰炭疽菌（C.cliviae）、喀斯特炭疽菌（C.karstii）、菠菜炭疽菌（C.spinaciae）、C.fructicola、C.brevispora、C.liriopes、C.godetiae、C.salicis和斯高威尔炭疽菌（C.scovillei）等[1-6]。据笔者鉴定，天津地区辣椒炭疽病的病原主要为C.truncatum和C.scovillei（未发表）。
C.scovillei引起的辣椒炭疽病在我国是由Liu等[7]在四川辣椒果实上首次发现，之后在我国不同地区陆续被报道[6，8]，笔者通过试验证实C.scovillei对辣椒果实的致病力较强，测定了戊唑醇对C.truncatum和C.scovillei的室内抑菌效果，明确了其敏感性差异，旨在为有效防治辣椒炭疽病提供理論依据。
1 材料与方法
1.1 试验材料
1.1.1 供试药剂 。97%戊唑醇（tebuconazole）原药，沈阳科创化学品有限公司。
1.1.2 供试菌株 。 菌株CA1、CA2、CA3均为斯高威尔炭疽菌（Colletotrichum scovillei），采集地点分别为宁河区板桥镇、武清区豆张庄镇和西青区第六阜镇;菌株CT1、CT2、CT3、CT4和CT5均为平头炭疽菌（C.truncatum），采集地点分别为宁河区板桥镇、武清区豆张庄镇、武清区大碱厂镇、武清区西王庄镇和西青区第六阜镇。所有菌株均来自于天津市植物保护研究所蔬菜病害研究室。
1.2 试验方法 采用菌丝生长速率法[9]测定戊唑醇对辣椒炭疽病菌的抑菌率。供试药剂先用少量二甲基甲酰胺溶解，然后用水溶解稀释，根据药剂活性，将药剂的质量浓度分别设置为200、100、50、10、1、0.1 μg/mL;在无菌操作下，根据试验处理吸取预先融化的灭菌培养基36 mL加入到无菌50 mL三角瓶中，从低浓度到高浓度依次吸取4 mL药液，分别加入上述三角瓶中，充分摇匀。然后等量倒入3个培养皿中（直径为9 cm），制成相应浓度的含药平板。设不含药剂的处理作为空白对照，每个处理3个重复。 将培养好的病原菌，在无菌条件下用灭菌打孔器（直径为3 mm）在菌落边缘切取菌饼，用接种器将菌饼接种于含药平板中央，菌丝面朝上，盖上皿盖，置于25 ℃培养箱中培养7 d后，用卡尺测量菌落直径，每个菌落用十字交叉法垂直测量直径各1次，取其平均值，试验设3个重复，计算各药剂对辣椒炭疽病菌的抑菌率 。抑菌率= （空白对照菌落半径-药剂处理菌落半径 ）/空白对照菌落半径×100%。
1.3 数据分析 利用SPSS 19.0软件对试验数据进行分析。
2 结果与分析
由表1可知，戊唑醇对5株不同来源的C.truncatum菌株的EC50值在22.189 4～187.157 4 μg/mL，EC50值最小的菌株来源于武清区豆张庄镇，为22.189 4 μg/mL，这说明C.truncatum很可能对戊唑醇不敏感。由表2可知，戊唑醇对3株不同来源的C.scovillei菌株的EC50值在0.240 4～0.298 0 μg/mL，各EC50值差距很小，说明C.scovillei很可能对戊唑醇敏感。
3 结论与讨论
该研究证实3株不同地点的C.scovillei对戊唑醇均表现为敏感，而5株不同地点的C.truncatum对戊唑醇均表现为不敏感。研究表明，不同种类辣椒炭疽菌对同一药剂的敏感性存在较大差异[10]。因此对于辣椒炭疽病的田间防治，应明确辣椒炭疽病病原，若病原单纯由C.scovillei侵染，可以用戊唑醇进行防治，若病原单纯为C.truncatum，应避免应用戊唑醇进行炭疽病的防治。当炭疽菌混合侵染时，可以选择对不同种类辣椒炭疽菌均敏感的药剂或含有戊唑醇的复配药剂进行防治，以达到更好的防治效果。
参考文献
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[4] DE SILVA D D，GROENEWALD J Z，CROUS P W，et al.Identification，prevalence and pathogenicity of Colletotrichum species causing anthracnose of Capsicum annuum in Asia[J].IMA Fungus，2019，10：1-32.
[5] MONGKOLPORN O，TAYLOR P.Chili anthracnose： Colletotrichum taxonomy and pathogenicity[J].Plant pathology，2018，67（6）：1255-1263.
[6] DIAO Y Z，ZHANG C，LIU F，et al.Colletotrichum species causing anthracnose disease of chili in China[J].Persoonia，2017，38：20-37.
[7] LIU F L，TANG G T，ZHENG X J，et al.Molecular and phenotypic characterization of Colletotrichum species associated with anthracnose disease in peppers from Sichuan Province，China[J].Scientific Reports，2016，6（1）：147-182.
[8] GAO Y Y，HE L F，LI B X，et al.The potential of fludioxonil for anthracnose control on China chili fruit[J].Phytoparasitica，2017，45（3）：281-292.
[9] 朱春雨，吳新平，徐文平，等.中华人民共和国农业行业标准（农药室内生物测定试验准则 杀菌剂 第2部分：抑制病原真菌菌丝生长试验 平皿法：NY/T 1156.2—2006[S].北京：中国农业出版社，2006.
[10] 满益龙，谭新球，司乃国，等.不同辣椒炭疽病菌对唑菌酯的敏感性差异[J].植物保护，2016，42（5）：171-176.