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【摘要】 目的 探讨妊娠期肺炎支原体（MP）感染患者免疫功能的变化。方法 选择非妊娠期健康妇女35例为对照组，41例为正常妊娠组，37例为妊娠期感染MP组。分别对各组妇女进行体液免疫功能（IgG、IgM、IgA、C3、C4）和细胞免疫功能（T淋巴细胞及其亚群CD3+、CD4+、CD8+、CD4+/CD8+）检测。结果 （1）正常妊娠组IgG、IgM、IgA、C3、C4较对照组下降，但差异无统计学意义（P＞0.05）；妊娠期感染MP后IgG水平升高，但与正常妊娠组比较，差异无统计学意义（P＞0.05）；妊娠期感染MP后IgM、IgA、C3、C4升高，与正常妊娠组比较，差异有统计学意义（P＜0.05或P＜0.01）。（2）正常妊娠组CD3+与对照组比较，差异无统计学意义（P＞0.05）；正常妊娠组CD4+、CD4+/CD8+较对照组下降，差异有统计学意义（P＜0.05）；正常妊娠组CD8+较对照组显著升高，差异有统计学意义（P＜0.01）；妊娠期感染MP后，CD3+、CD4+、CD4+/CD8+较正常妊娠组均显著下降，差异有统计学意义（P＜0.01）。三组中CD8+呈显著性持续升高。结论 妊娠期感染MP后可引起体液免疫功能亢进、免疫应答不平衡、补体系统激活，以及细胞免疫功能受到严重抑制。在治疗过程中，应密切监测免疫功能的变化，以提高疗效，减少并发症和病理妊娠，确保母婴安全。
【关键词】 妊娠期； 肺炎支原体； 免疫功能
肺炎支原体（MP）主要感染呼吸道，引起上呼吸道感染、咽炎、气管炎、支气管炎、肺炎及肺外并发症。目前认为其发病机理除病原菌直接侵害外还与免疫损伤有关。当MP感染发生在免疫功能特殊人群，如孕妇，其免疫反应过程变得更为复杂，甚至出现免疫功能紊乱，导致病程迁延，对母婴安全及优生优育带来危害。本研究拟对非妊娠对照组、正常妊娠组和妊娠期MP感染组妇女进行体液免疫和细胞免疫功能检测，以探讨妊娠期感染MP后引起的免疫功能变化。
1 资料与方法
1.1 一般资料 2010年1月～2011年4在本院就诊孕妇中，经临床、血清MP-IgM抗体（日本富士肺炎支原体检测试剂 SERODIA-MYCO Ⅱ凝集试验）检测确诊为MP感染患者37例，年龄21～36岁，平均26.9岁，胎龄10～33周，平均23.9周；正常妊娠妇女41例，年龄22～35岁，平均27.2岁，胎龄12～34周，平均25.1周；非妊娠健康妇女为对照组35例，年龄20～35岁，平均25.7岁。以上各组研究对象均排除慢性高血压、糖尿病、慢性肾病和肝病以及免疫性疾病等病史，各组研究对象的年龄、胎龄差异均无统计学意义。
1.2 方法
1.2.1 样本收集 对所选取的妇女进行空腹抽取外周静脉血3 ml，3000 r/min，离心5 min,分离血清，用于IgG、IgM、IgA、C3、C4检测；抽取静脉血2 ml采用EDTA抗凝，用于T淋巴细胞及其亚群检测（CD3+、CD4+、CD8+、CD4+/CD8+）。
1.2.2 试剂和仪器 采用免疫透射比浊法在奥林巴斯AU400全自动生化分析仪上检测IgG、IgM、IgA、C3、C4，试剂由日本第一化学试剂公司提供；采用免疫荧光法在BD FACS CaliburTM 流式细胞仪上检测T淋巴细胞及其亚群，试剂由BD司生产。以上检测严格按试剂盒说明书要求进行。
1.3 统计方法 实验数据采用Minitab 15统计学软件进行分析，检测结果以均数±标准差（x±s）表示，采用t检验。
2 结果
2.1 非妊娠健康组、正常妊娠组和妊娠期MP感染组体液免疫功能检测结果，见表1。正常妊娠组IgG、IgM、IgA、C3、C4较对照组下降，但差异无统计学意义（P＞0.05）；妊娠期感染MP后IgG水平升高，但与正常妊娠组比较，差异无统计学意义（P＞0.05）；妊娠期感染MP后IgM、IgA、C3、C4升高，与正常妊娠组比较，差异有统计学意义（P＜0.05或P＜0.01）。
2.2 非妊娠健康组、正常妊娠组和妊娠期MP感染组细胞免疫功能检测结果，见表2。正常妊娠组CD3+与对照组比较，差异无统计学意义（P＞0.05）；正常妊娠组CD4+、CD4+/CD8+较对照组下降，差异有统计学意义（P＜0.05）；正常妊娠组CD8+较对照组显著升高，差异有统计学意义（P＜0.01）；妊娠期感染MP后，CD3+、CD4+、CD4+/CD8+较正常妊娠组均显著下降，差异有统计学意义（P＜0.01）。三组中CD8+呈显著性持续升高。
3 讨论
正常机体免疫应答过程有赖于各种免疫细胞之间的相互协作和相互制约，以形成适度的免疫应答。迄今肺炎支原体的发病机制仍不十分清楚，主要有免疫学发病机制、呼吸道上皮吸附作用、MP直接侵入学说。目前较倾向于免疫学发病机制，认为免疫调节异常在肺炎支原体肺炎（mycoplasma pneumoniae pneumonia，MPP）的发生、发展中可能起重要作用。近年有研究证实，支原体感染与体液免疫、细胞免疫均有关［1,2］，存在机体免疫逃逸、免疫调节、免疫抑制、免疫蓄积等多种免疫作用［3］。妊娠从免疫学上讲，类似于器官移植，带有父方同种异体抗原的胚胎，对母体来说是一个半同种移植物。正常妊娠过程中，母体能通过自身的免疫调节系统，进行正常的免疫调节，有效制约母体对胎儿产生的排斥反应，使整个妊娠过程顺利完成。若机体免疫系统调节功能异常、紊乱，则导致病理妊娠。妊娠期免疫功能的变化改变了孕妇对疾病的易感性以及感染后病情的严重程度。
在本研究中，正常孕妇IgG、IgM、IgA、C3、C4与正常对照组比较，差异无统计学意义，提示体液免疫较少参与妊娠期的免疫调节过程。孕妇T淋巴细胞CD3+比率，无显著变化，但CD4+、CD4+/CD8+比率显著低于正常对照组，CD8+显著升高，提示妊娠期妇女的CD3+T（总T细胞淋巴细胞）数量没有显著改变，但T细胞亚群比率发生改变，具有促进免疫应答的CD4+T（辅助性T细胞/Th）减少，抑制免疫应答的CD8+T（细胞毒性T细胞/Tc和抑制性T细胞/Ts）数量升高，表明细胞免疫应答反应减弱和抑制增强。这种变化的意义在于，妊娠期的母体通过自身细胞免疫功能的抑制作用从而维持正常的妊娠，避免对胎儿的排斥反应。孕妇T淋巴细胞系统的免疫应答反应减弱，导致对感染的抵抗力下降，容易受到病原菌感染侵袭。孕妇在感染MP后IgG无显著改变，IgM、IgA、C3、C4显著升高，提示各种免疫球蛋白、免疫复合物、补体经典及旁路途径在MP感染中均发挥作用,同时存在体液免疫功能亢进、体液免疫应答不平衡。补体系统激活过程中，可产生多种生物活性物质，引起一系列生物学效应，参与机体的抗感染免疫，扩大体液免疫效应，调节免疫应答。同时，也可介导炎症反应，导致组织损伤。T淋巴细胞CD3+、CD4+、CD4+/CD8+持续下降及CD8+持续升高，机体细胞免疫功能受到更严重的抑制，破坏母体－胎儿间免疫调节平衡，对母、胎机体产生影响，同时也使孕妇更易受到各种病原微生物感染，易发生病理性妊娠、流产、先天畸形等。
国内外对肺炎支原体肺炎的研究工作主要集中在少儿感染。据资料分析表明，成人肺炎支原体肺炎近年来有增多趋势［4］，发病率女性高于男性。对于肺炎支原体肺炎患儿的免疫功能的研究，国内文献报道的结果非常矛盾，大多数学者认为，MP感染患儿血清免疫球蛋白水平升高［5～7］,也有报道MP感染患儿免疫球蛋白水平下降［8，9］。本研究组的检测结果显示，妊娠期MP感染后可致体液免疫功能亢进、免疫应答不平衡及存在补体系统的激活，同时感染者细胞免疫功能受抑制，细胞免疫功能低下，存在免疫功能紊乱。笔者还观察到，妊娠期感染者病程较一般人群要长，这可能与感染者免疫功能紊乱有关。因此，笔者建议在对妊娠期MP感染患者治疗时，要密切监测免疫功能的变化，适当调节患者免疫功能，提高疗效，缩短病程，减少并发症和病理妊娠，确保母婴安全。
参 考 文 献
［1］ Hassan J,Irwin F,Dooley S,et al.Mycoplasma pneumoniae infection in a pediatric population:analysis of soluble immune markers as risk factors for asthma.Hum Immunol,2008,69（12）:851-855.
［2］ Shimizu T,Kida Y,Kuwano K.Triacylated lipoproteins derived from Mycoplasma pneumoniae activate nuclear factor kappaB through toll like receptors 1 and 2.Immunology,2007,121（4）:473-483.
［3］ Stelmach I,Podsiadlowicz Borzecka M,Grzelewski T,et al.Humoral and cellular immunity in children with Mycoplasma pneumoniae infection:a 1 year prospective study.Clin Diagn Lab Immunol,2005,12（10）:1246-1250.
［4］ 陈灏珠.实用内科学.第12版.北京：人民卫生出版社，2004：441-443.
［5］ 李芳君，杨军，陈志刚.儿童肺炎支原体肺炎免疫功能检测结果分析.临床儿科杂志，2004，22（4）：211.
［6］ 赵平，陈亚娜，赵华.肺炎支原体肺炎患儿的免疫功能的变化.山东医药，2002，42（20）：32－33.
［7］ 杨莉，李海浪，李丽.肺炎支原体肺炎患儿免疫发病机制及临床分析.实用临床儿科杂志，2003，18（12）：975－976.
［8］ 杨改标，郭文静，刘文彬.肺炎支原体肺炎患儿的免疫功能观察.Chin J Child Health Care,1999,17（1）:16.
［9］ 宁怀军.肺炎支原体肺炎导致免疫力低下的临床观察.医学文选，2003，22（6）：889.
（收稿日期：2011-05-05）
（本文编辑：车艳）
【关键词】 妊娠期； 肺炎支原体； 免疫功能
肺炎支原体（MP）主要感染呼吸道，引起上呼吸道感染、咽炎、气管炎、支气管炎、肺炎及肺外并发症。目前认为其发病机理除病原菌直接侵害外还与免疫损伤有关。当MP感染发生在免疫功能特殊人群，如孕妇，其免疫反应过程变得更为复杂，甚至出现免疫功能紊乱，导致病程迁延，对母婴安全及优生优育带来危害。本研究拟对非妊娠对照组、正常妊娠组和妊娠期MP感染组妇女进行体液免疫和细胞免疫功能检测，以探讨妊娠期感染MP后引起的免疫功能变化。
1 资料与方法
1.1 一般资料 2010年1月～2011年4在本院就诊孕妇中，经临床、血清MP-IgM抗体（日本富士肺炎支原体检测试剂 SERODIA-MYCO Ⅱ凝集试验）检测确诊为MP感染患者37例，年龄21～36岁，平均26.9岁，胎龄10～33周，平均23.9周；正常妊娠妇女41例，年龄22～35岁，平均27.2岁，胎龄12～34周，平均25.1周；非妊娠健康妇女为对照组35例，年龄20～35岁，平均25.7岁。以上各组研究对象均排除慢性高血压、糖尿病、慢性肾病和肝病以及免疫性疾病等病史，各组研究对象的年龄、胎龄差异均无统计学意义。
1.2 方法
1.2.1 样本收集 对所选取的妇女进行空腹抽取外周静脉血3 ml，3000 r/min，离心5 min,分离血清，用于IgG、IgM、IgA、C3、C4检测；抽取静脉血2 ml采用EDTA抗凝，用于T淋巴细胞及其亚群检测（CD3+、CD4+、CD8+、CD4+/CD8+）。
1.2.2 试剂和仪器 采用免疫透射比浊法在奥林巴斯AU400全自动生化分析仪上检测IgG、IgM、IgA、C3、C4，试剂由日本第一化学试剂公司提供；采用免疫荧光法在BD FACS CaliburTM 流式细胞仪上检测T淋巴细胞及其亚群，试剂由BD司生产。以上检测严格按试剂盒说明书要求进行。
1.3 统计方法 实验数据采用Minitab 15统计学软件进行分析，检测结果以均数±标准差（x±s）表示，采用t检验。
2 结果
2.1 非妊娠健康组、正常妊娠组和妊娠期MP感染组体液免疫功能检测结果，见表1。正常妊娠组IgG、IgM、IgA、C3、C4较对照组下降，但差异无统计学意义（P＞0.05）；妊娠期感染MP后IgG水平升高，但与正常妊娠组比较，差异无统计学意义（P＞0.05）；妊娠期感染MP后IgM、IgA、C3、C4升高，与正常妊娠组比较，差异有统计学意义（P＜0.05或P＜0.01）。
2.2 非妊娠健康组、正常妊娠组和妊娠期MP感染组细胞免疫功能检测结果，见表2。正常妊娠组CD3+与对照组比较，差异无统计学意义（P＞0.05）；正常妊娠组CD4+、CD4+/CD8+较对照组下降，差异有统计学意义（P＜0.05）；正常妊娠组CD8+较对照组显著升高，差异有统计学意义（P＜0.01）；妊娠期感染MP后，CD3+、CD4+、CD4+/CD8+较正常妊娠组均显著下降，差异有统计学意义（P＜0.01）。三组中CD8+呈显著性持续升高。
3 讨论
正常机体免疫应答过程有赖于各种免疫细胞之间的相互协作和相互制约，以形成适度的免疫应答。迄今肺炎支原体的发病机制仍不十分清楚，主要有免疫学发病机制、呼吸道上皮吸附作用、MP直接侵入学说。目前较倾向于免疫学发病机制，认为免疫调节异常在肺炎支原体肺炎（mycoplasma pneumoniae pneumonia，MPP）的发生、发展中可能起重要作用。近年有研究证实，支原体感染与体液免疫、细胞免疫均有关［1,2］，存在机体免疫逃逸、免疫调节、免疫抑制、免疫蓄积等多种免疫作用［3］。妊娠从免疫学上讲，类似于器官移植，带有父方同种异体抗原的胚胎，对母体来说是一个半同种移植物。正常妊娠过程中，母体能通过自身的免疫调节系统，进行正常的免疫调节，有效制约母体对胎儿产生的排斥反应，使整个妊娠过程顺利完成。若机体免疫系统调节功能异常、紊乱，则导致病理妊娠。妊娠期免疫功能的变化改变了孕妇对疾病的易感性以及感染后病情的严重程度。
在本研究中，正常孕妇IgG、IgM、IgA、C3、C4与正常对照组比较，差异无统计学意义，提示体液免疫较少参与妊娠期的免疫调节过程。孕妇T淋巴细胞CD3+比率，无显著变化，但CD4+、CD4+/CD8+比率显著低于正常对照组，CD8+显著升高，提示妊娠期妇女的CD3+T（总T细胞淋巴细胞）数量没有显著改变，但T细胞亚群比率发生改变，具有促进免疫应答的CD4+T（辅助性T细胞/Th）减少，抑制免疫应答的CD8+T（细胞毒性T细胞/Tc和抑制性T细胞/Ts）数量升高，表明细胞免疫应答反应减弱和抑制增强。这种变化的意义在于，妊娠期的母体通过自身细胞免疫功能的抑制作用从而维持正常的妊娠，避免对胎儿的排斥反应。孕妇T淋巴细胞系统的免疫应答反应减弱，导致对感染的抵抗力下降，容易受到病原菌感染侵袭。孕妇在感染MP后IgG无显著改变，IgM、IgA、C3、C4显著升高，提示各种免疫球蛋白、免疫复合物、补体经典及旁路途径在MP感染中均发挥作用,同时存在体液免疫功能亢进、体液免疫应答不平衡。补体系统激活过程中，可产生多种生物活性物质，引起一系列生物学效应，参与机体的抗感染免疫，扩大体液免疫效应，调节免疫应答。同时，也可介导炎症反应，导致组织损伤。T淋巴细胞CD3+、CD4+、CD4+/CD8+持续下降及CD8+持续升高，机体细胞免疫功能受到更严重的抑制，破坏母体－胎儿间免疫调节平衡，对母、胎机体产生影响，同时也使孕妇更易受到各种病原微生物感染，易发生病理性妊娠、流产、先天畸形等。
国内外对肺炎支原体肺炎的研究工作主要集中在少儿感染。据资料分析表明，成人肺炎支原体肺炎近年来有增多趋势［4］，发病率女性高于男性。对于肺炎支原体肺炎患儿的免疫功能的研究，国内文献报道的结果非常矛盾，大多数学者认为，MP感染患儿血清免疫球蛋白水平升高［5～7］,也有报道MP感染患儿免疫球蛋白水平下降［8，9］。本研究组的检测结果显示，妊娠期MP感染后可致体液免疫功能亢进、免疫应答不平衡及存在补体系统的激活，同时感染者细胞免疫功能受抑制，细胞免疫功能低下，存在免疫功能紊乱。笔者还观察到，妊娠期感染者病程较一般人群要长，这可能与感染者免疫功能紊乱有关。因此，笔者建议在对妊娠期MP感染患者治疗时，要密切监测免疫功能的变化，适当调节患者免疫功能，提高疗效，缩短病程，减少并发症和病理妊娠，确保母婴安全。
参 考 文 献
［1］ Hassan J,Irwin F,Dooley S,et al.Mycoplasma pneumoniae infection in a pediatric population:analysis of soluble immune markers as risk factors for asthma.Hum Immunol,2008,69（12）:851-855.
［2］ Shimizu T,Kida Y,Kuwano K.Triacylated lipoproteins derived from Mycoplasma pneumoniae activate nuclear factor kappaB through toll like receptors 1 and 2.Immunology,2007,121（4）:473-483.
［3］ Stelmach I,Podsiadlowicz Borzecka M,Grzelewski T,et al.Humoral and cellular immunity in children with Mycoplasma pneumoniae infection:a 1 year prospective study.Clin Diagn Lab Immunol,2005,12（10）:1246-1250.
［4］ 陈灏珠.实用内科学.第12版.北京：人民卫生出版社，2004：441-443.
［5］ 李芳君，杨军，陈志刚.儿童肺炎支原体肺炎免疫功能检测结果分析.临床儿科杂志，2004，22（4）：211.
［6］ 赵平，陈亚娜，赵华.肺炎支原体肺炎患儿的免疫功能的变化.山东医药，2002，42（20）：32－33.
［7］ 杨莉，李海浪，李丽.肺炎支原体肺炎患儿免疫发病机制及临床分析.实用临床儿科杂志，2003，18（12）：975－976.
［8］ 杨改标，郭文静，刘文彬.肺炎支原体肺炎患儿的免疫功能观察.Chin J Child Health Care,1999,17（1）:16.
［9］ 宁怀军.肺炎支原体肺炎导致免疫力低下的临床观察.医学文选，2003，22（6）：889.
（收稿日期：2011-05-05）
（本文编辑：车艳）