人生长激素慢病毒载体的构建及其在鼠骨骼肌成肌细胞中的表达

• 作 者: 刘向阳 卢永昕 徐玉兰 李小青 刘隽 李爱华 罗萍 万建平
• 机 构: 华中科技大学同济医学院附属协和医院心血管内科,华中科技大学同济医学院附属协和医院湖北省干细胞应用与研究中心
• 出 处: 生物工程学报
• 发表日期: 2006年2期
• 关键词: 生长激素 慢病毒载体 载体构建 成肌细胞 基因表达 human growth hormone lentiviral vector vector constr
• 基金项目: 国家高技术研究发展计划（863计划）资助项目（No：2002AA745070）.致谢 湖北省干细胞应用与研究中心的张佳华工程师为本文提供了帮助,特此致谢.

构建能表达人生长激素（hGH）的pLentivirus6／V5-hGH载体，并实现hGH基因在骨骼肌成肌细胞中大量、长期和稳定的表达。体外培养SD鼠骨骼肌成肌细胞，并通过免疫组织化学方法鉴定所得细胞、用台酚兰染色确定培养细胞的活性并绘制生长曲线。将目的基因hGH亚克隆到真核细胞表达栽体pLenti6／V5-D—TOPO载体上，构建重组质粒pLentivims6/V5-hGH。将pLenti6／V5-hGH及阳性对照质粒pLenti6／V5-EGFP分别用Lipofectamin 2000介导转染体外培养的