利用枯草芽孢杆菌ytkA和ywoF基因启动子与信号肽重组分泌表达mpd基因

• 作 者: 张晓舟 闫新 崔中利 李顺鹏
• 机 构: 南京农业大学生命科学学院,农业部农业环境微生物工程重点开放实验室
• 出 处: 生物工程学报
• 发表日期: 2006年2期
• 关键词: 枯草芽孢杆菌 ytkA基因 ywoF基因 启动子 信号肽 mpd基因 分泌表达 Bacillus subtilis ytkA gene ywoF gene
• 基金项目: 国家自然科学基金（No.30300005）,国家“863计划”（No.2004246070,2004214102）和国家科技攻关项目（No.2005BA516A02-01.2005BA516A02-02）资助.致谢 感谢美国芽孢杆菌保藏中心（Bacillus Genetic Stock Center,BGSC）Daniel Zeigler教授惠赠枯草芽抱杆菌1Al、1A751和质粒pNW33N及p

用大肠杆菌-枯草芽孢杆菌穿梭载体pNW33N和去除了信号肽编码序列的成熟mpd基因构建了穿梭启动子探针pNW33N—mpd。用该探针从质粒pMPDP3和pMPDP29上克隆来自于枯草芽孢杆菌ytkA和ywoF基因上游的启动子功能片段，构建了穿梭表达载体pNYTM和pNYWM。将表达载体pNYTM和pNYWM转入枯草芽孢杆菌1A751获得表达菌株1A751（pNYTM）和1A751（pNYTM），mpd基因在ytkA和ywoF基因的启动子和信号肽的带动下实现了分泌表达且具有天然活性，结果表明ytkA基因的启