【摘 要】
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本研究采用L16(45)正交试验设计法对山羽藓ISSR-PCR反应进行优化试验.研究结果表明,山羽藓ISSR-PCR最佳反应体系(25μL)为:Taq DNA聚合酶0.8U,Mg2+1.5 mmol/L,dNTPs 0.4 mmol
【机 构】
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内蒙古大学生命科学学院,呼和浩特,010021
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本研究采用L16(45)正交试验设计法对山羽藓ISSR-PCR反应进行优化试验.研究结果表明,山羽藓ISSR-PCR最佳反应体系(25μL)为:Taq DNA聚合酶0.8U,Mg2+1.5 mmol/L,dNTPs 0.4 mmol/L,引物0.6 μmol/L和模板DNA 40 ng,对该反应体系的影响顺序为:TaqDNA聚合酶>引物>dNTPs>模板DNA>Mg2+.同时筛选出12条适合山羽藓的ISSR引物,并确定了每条引物的最适退火温度.所建立的体系稳定可靠,条带清晰且多态性丰富,可为后续开展山羽藓种植资源、遗传多样性及分子亲缘地理学研究奠定基础.
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