【摘 要】
：
目的 证实去泛素化酶USP22参与雌激素受体α(ERα)介导的基因转录调控进而在血管钙化中发挥重要作用.方法 将人主动脉平滑肌细胞(hASMC)分别接种于正常培养基、含1.25 mmol/L CAL、2.5 mmol/L CAL、5 mmol/L CAL的培养基中培养0、3、7、9天.用1％/2％茜素红染色,倒置相差显微镜观察钙化情况;在5 mmol/L CAL条件下培养0、3、7、9天,Western blot实验检测钙化相关蛋白骨形态发生蛋白2(BMP-2)、核因子κB的受体激活剂配体(RANKL)、
【机 构】
：
锦州医科大学附属第三医院心内科,辽宁省锦州市121000;93263部队锦州场站医院,辽宁省锦州市121000;中国医科大学附属第一医院老年病科,辽宁省沈阳市110001
论文部分内容阅读
目的 证实去泛素化酶USP22参与雌激素受体α(ERα)介导的基因转录调控进而在血管钙化中发挥重要作用.方法 将人主动脉平滑肌细胞(hASMC)分别接种于正常培养基、含1.25 mmol/L CAL、2.5 mmol/L CAL、5 mmol/L CAL的培养基中培养0、3、7、9天.用1％/2％茜素红染色,倒置相差显微镜观察钙化情况;在5 mmol/L CAL条件下培养0、3、7、9天,Western blot实验检测钙化相关蛋白骨形态发生蛋白2(BMP-2)、核因子κB的受体激活剂配体(RANKL)、环氧合酶2(COX-2)、vitk依赖的分泌性蛋白(Gas6)、ERα的蛋白表达;双荧光素酶报告基因实验检测在hASMC中,USP22是否参与ERα介导的基因转录调控;过表达USP22,Western blot实验检测钙化相关因子BMP-2、RANKL、COX-2、Gas6和ERα的蛋白表达.结果 在1.25 mmol/L CAL条件下培养到第9天,hASMC有明显的钙沉积;在2.5 mmol/L CAL、5 mmol/L CAL条件下培养到第7天hASMC出现钙沉积,第9天有明显钙沉积.hASMC在5 mmol/L CAL培养条件下,RANKL、BMP-2、USP22蛋白表达增加.双荧光素酶报告基因实验检测结果表明,在hASMC中USP22抑制ERα介导的基因转录调控;Western blot实验结果显示,过表达USP22,ERα的下游基因Gas6蛋白表达减少.结论 在5 mmol/L CAL培养的条件下,hASMC钙化模型建立成功;USP22可能通过抑制ERα介导的下游基因Gas6的基因转录进而促进hASMC钙化.
其他文献
目的 观察竹圈盐熨灸神阙穴等对脾胃虚寒型胃脘痛的干预效果,评价其安全性和有效性.方法 选取2018年10月至2019年5月江苏省中医院就诊的脾胃虚寒型胃脘痛患者60例作为研究对象,采用随机数字表法将研究对象分为干预组和对照组,每组30例.对照组采用电子艾灸治疗,干预组采用竹圈盐熨灸治疗.对比分析两组治疗前后胃脘疼痛评分及中医证候积分、中医证候疗效、操作满意度情况.结果 干预组患者胃脘疼痛评分和胃肠疾病中医症状得分在第7天、第13天、出院时均低于对照组,差异具有统计学意义(P＜0.05,P＜0.01),干预
线粒体相关内质网膜是指内质网和线粒体之间高度动态的紧密连接部分,参与维持内质网和线粒体的正常功能,与细胞脂质代谢、钙稳态、线粒体动力学、自噬和凋亡、内质网应激和炎症等密切相关.研究显示线粒体相关内质网膜功能异常或者数量和结构改变参与心血管疾病的发生发展.本文总结了线粒体相关内质网膜的功能,阐述了其在心血管疾病中的作用及可能机制,为线粒体相关内质网膜成为心血管疾病治疗的新靶点提供理论参考.
目的 观察姜黄素对人肝癌细胞HepG2脂质摄取的影响是否与驱动蛋白16B (KIF16B)有关,探索姜黄素的降脂机制.方法 (1)将体外培养的HepG2细胞分为对照组(姜黄素浓度为0)和20、30、40 μmol/L姜黄素处理组,CCK8法检测细胞活性,以确定合适的姜黄素药物作用浓度.(2)将体外培养的HepG2细胞分为空白对照组、阴性对照组、瑞舒伐他汀(阳性药物)组和姜黄素组.胆固醇检测试剂盒检测HepG2细胞内胆固醇含量;荧光显微镜观察细胞对DiI标记的低密度脂蛋白(DiI-LDL)的摄取情况;Wes
心血管疾病发病率和病死率持续增高,心肌缺血和心肌梗死是主要病因.心肺耐力反应了个体的心肺功能契合度以及对最大运动强度的耐受程度.心肺耐力为人体五大生命体征之一,可用于评价心血管疾病患病风险.心肺运动试验(CPET)作为新兴的心肺一体化客观无创检测技术,可以较早的推测出患者潜在的病理生理改变.CPET的数据解读相对复杂及未得到广泛普及,其在临床的应用潜力巨大.目前CPET应用领域包括疾病的诊断、病情及预后风险评估、运动处方制定等.用CPET对心血管疾病的早期风险予以评估和诊断,实现早干预、早治疗,符合心脏康
目的 探讨N-乙酰半胱氨酸(NAC)能否通过抑制JAK2/STAT3信号通路对高糖诱导的内皮细胞损伤起保护作用.方法 体外分别应用不同浓度NAC对人脐静脉内皮细胞(HUVEC)进行预处理,筛选出NAC减轻高糖诱导的HUVEC细胞毒性的最佳浓度.使用最佳浓度的NAC预处理高糖诱导的HUVEC,通过CCK-8检测细胞存活率,Hoechst33258核染色荧光显微镜照相法检测内皮细胞凋亡的形态学改变,Western blot检测JAK2/STAT3信号通路的蛋白表达水平,DCFH-DA检测细胞内活性氧水平,EL
目的 应用德尔菲法(Delphi法)构建甲状腺癌围术期护理敏感质量指标,为甲状腺癌围术期护理质量测量提供参考依据.方法 检索国内外文献,结合临床护理实践经验以及护理不良事件,以“结构-过程-结果”模式为理论框架,通过小组讨论,初拟甲状腺癌围术期护理质量敏感性指标及其计算公式与资料收集方法.经两轮专家函询,确立甲状腺癌围术期护理质量敏感性指标体系.结果 两轮函询专家积极系数均为100％,权威系数为0.877,协调程度为0.322～0.576;构建了包含3项一级指标、6项二级指标、22项三级指标在内的甲状腺围
目的 研究苯并(a)芘(BaP)影响人脐静脉内皮细胞(HUVEC)自噬的机制.方法 HUVEC经BaP(2.5、5、10μmol/L)处理24h后,分别采用间接免疫荧光法、Western blot、吖啶橙染色和单丹磺酰尸胺染色等技术方法,检测自噬体及其内容物降解、目标蛋白微管相关蛋白1轻链3(LC3)、选择性自噬接头蛋白p62、Beclin-1、自噬相关蛋白5(Atg5)、Atg7、Atg12、组织蛋白酶B(CTSB)、组织蛋白酶D(CTSD)、突触融合蛋白17(STX17)、溶酶体关联膜蛋白2(LAMP
目的 探讨阻塞性睡眠呼吸暂停综合征(OSAS)对不稳定型心绞痛(UAP)患者外周血C1q水平的影响,及其与经皮冠状动脉介入治疗(PCI)后血小板聚集率(PAR)之间的相关性.方法 连续入选2018年7月-2019年7月在北京安贞医院行PCI术的UAP患者182例,所有患者均行多导睡眠监测.以呼吸暂停低通气指数(AHI)≥15的患者为OSAS组(n=92),AHI＜15的患者为对照组(n=90).检测患者血清C1q水平和二磷酸腺苷诱导的PAR.分析AHI、血清C1q与PAR的关系.结果 OSAS组血清C1q
目的 探讨Ras同源基因家族成员A(RhoA)/Rho相关卷曲螺旋蛋白激酶(ROCK)通路在缺氧复氧(H/R)诱导的人心肌AC16细胞损伤中的作用及其机制.方法 将体外培养的AC16细胞分为对照组(正常培养)、H/R组(构建H/R模型)、H/R+NC-siRNA组(转染NC-siRNA后构建H/R模型)和H/R+RhoA-siRNA组(转染RhoA-siRNA后构建H/R模型),采用MTT法检测AC16细胞存活率,流式细胞术检测AC16细胞凋亡率,比色法检测AC16细胞乳酸脱氢酶(LDH)活性和Caspa
目的 探讨原花青素B2(PCB2)对LPS诱导的心肌细胞损伤的保护作用及机制.方法 正常培养心肌细胞H9c2,用LPS诱导H9c2细胞建立细胞损伤模型,分别用6.25、12.5、25.0 μmol/L的PCB2处理模型细胞,25.0 μmol/L的PCB2处理模型细胞后加入核因子κB(NF-κB)信号通路抑制剂PDTC处理.采用MTT法检测细胞存活率;流式细胞术检测细胞凋亡率;酶联免疫吸附法(ELISA)检测细胞肿瘤坏死因子α(TNF-α)、白细胞介素1β(IL-1β)和白细胞介素6(IL-6)的水平;丙