【摘 要】
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目的 探讨原花青素B2(PCB2)对LPS诱导的心肌细胞损伤的保护作用及机制.方法 正常培养心肌细胞H9c2,用LPS诱导H9c2细胞建立细胞损伤模型,分别用6.25、12.5、25.0 μmol/L的PCB2处理模型细胞,25.0 μmol/L的PCB2处理模型细胞后加入核因子κB(NF-κB)信号通路抑制剂PDTC处理.采用MTT法检测细胞存活率;流式细胞术检测细胞凋亡率;酶联免疫吸附法(ELISA)检测细胞肿瘤坏死因子α(TNF-α)、白细胞介素1β(IL-1β)和白细胞介素6(IL-6)的水平;丙
【机 构】
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荆州市第二人民医院药剂科,湖北省荆州市434000;湖北文理学院附属医院襄阳市中心医院心内科,湖北省襄阳市441021
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目的 探讨原花青素B2(PCB2)对LPS诱导的心肌细胞损伤的保护作用及机制.方法 正常培养心肌细胞H9c2,用LPS诱导H9c2细胞建立细胞损伤模型,分别用6.25、12.5、25.0 μmol/L的PCB2处理模型细胞,25.0 μmol/L的PCB2处理模型细胞后加入核因子κB(NF-κB)信号通路抑制剂PDTC处理.采用MTT法检测细胞存活率;流式细胞术检测细胞凋亡率;酶联免疫吸附法(ELISA)检测细胞肿瘤坏死因子α(TNF-α)、白细胞介素1β(IL-1β)和白细胞介素6(IL-6)的水平;丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)试剂盒分别检测MDA含量和SOD、GSH-Px活性;Westem blot检测细胞中NF-κB、IκB-α蛋白表达.结果 LPS组细胞存活率较对照组显著降低(P＜0.05),而PCB2显著升高细胞存活率(P＜0.05).LPS组细胞凋亡率较对照组显著升高(P＜0.05),而PCB2显著降低LPS处理的细胞凋亡率(P＜0.05).LPS组细胞TNF-α、IL-1β、IL-6水平较对照组显著升高(P＜0.05),而PCB2显著降低LPS处理细胞TNF-α、IL-1β、IL-6水平(P＜0.05).与对照组比较,LPS组细胞MDA含量显著升高,SOD、GSH-Px活性显著降低(P＜0.05);PCB2显著降低LPS处理的细胞MDA含量,显著升高SOD、GSH-Px活性(P＜0.05).与对照组比较,LPS组细胞NF-κB蛋白表达显著升高,IκB-α蛋白表达显著降低(P＜0.05);与LPS组比较,PCB2显著降低细胞NF-κB蛋白表达,显著升高IκB-α蛋白表达(P＜0.05).与LPS+PCB2组相比,LPS+PCB2 +PDTC能显著降低细胞凋亡率和TNF-α、IL-1β、IL-6、MDA含量,显著升高SOD、GSH-Px活性.结论 PCB2降低LPS诱导的心肌细胞凋亡率、炎症水平和氧化应激,提高细胞存活率,这可能与抑制NF-κB信号通路的活化有关.
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