【摘 要】
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通过细胞融合建立分泌抗植酸酶单克隆抗体(mAb)的杂交瘤细胞株.采用体内诱生腹水法制备单克隆抗体,并对其免疫学特性进行鉴定.结果表明,筛选出2株杂交瘤细胞,其中,5C3细胞株
【机 构】
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河南省农业科学院,河南省农业科学院畜牧兽医研究所,郑州市兽药饲料监察所
【基金项目】
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河南省农业科学院博士科研启动基金
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通过细胞融合建立分泌抗植酸酶单克隆抗体(mAb)的杂交瘤细胞株.采用体内诱生腹水法制备单克隆抗体,并对其免疫学特性进行鉴定.结果表明,筛选出2株杂交瘤细胞,其中,5C3细胞株产生单抗亚型为IgG1型,效价为1:(1.02x106),IC50=100.07 ng/mL,亲和常数为6.70×109L/mol,与市售常规植酸酶、包被植酸酶及浓缩植酸酶的IC50分别达到130.43,126.16,125.33 ng/mL,交叉反应率分别为76.72%,79.32%和79.84%.与高温失活(100℃水煮5 min)的麸皮植酸酶、普通植酸酶、包被植酸酶及浓缩植酸酶IC50分别为4 205.45,4 015.86,3 593.19,3 610.40ng/mL,交叉反应率分别为2.38%,2.49%,2.78%,2.77%.说明成功筛选了杂交瘤细胞株,该细胞株能分泌抗植酸酶mAb,该植酸酶mAb对植酸酶亲和力高、特异性强、灵敏度好,为植酸酶ELISA检测试剂盒及试纸条研制奠定了基础.
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