【摘 要】
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以甘蓝自交系南宝为试验材料,采用L16(45)正交设计,对影响甘蓝SRAP的5个因素(模板DNA浓度、Mg2+浓度、dNTPs浓度、引物浓度、Taq酶)在4个水平上进行优化试验,建立了可扩增多
【机 构】
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西南大学园艺园林学院重庆市蔬菜学重点实验室南方山地园艺学教育部重点实验室,
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以甘蓝自交系南宝为试验材料,采用L16(45)正交设计,对影响甘蓝SRAP的5个因素(模板DNA浓度、Mg2+浓度、dNTPs浓度、引物浓度、Taq酶)在4个水平上进行优化试验,建立了可扩增多态性高、重复性好、稳定性强、带型清晰的最优反应体系(10μL):模板DNA 40ng、MgCl22.50mmol/L、dNTPs 0.20mmol/L、Primer0.30μmol/L、Taq酶0.40U,该体系能满足甘蓝基因组SRAP扩增的要求.
Using L16 (45) orthogonal design, five factors influencing cabbage SRAP (template DNA concentration, Mg2 + concentration, dNTPs concentration, primer concentration, Taq enzyme) The optimal reaction system (10μL) with high amplifiable polymorphism, good repeatability, strong stability and clear banding was established: template DNA 40ng, MgCl22.50mmol / L, dNTPs 0.20mmol / L, Primer 0.30μmol / L, Taq enzyme 0.40U, this system can meet the SRAP amplification requirements of cabbage genome.
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