【摘 要】
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目的 探讨不同浓度重组人转化生长因子β1(rhTGFβ1)诱导入近端肾小管上皮细胞(HKCs cells)发生小管上皮-间充质转分化(TEMT)过程中桩蛋白(Pax)的表达及金雀异黄素(Gen)干预来探讨Pax在此过程中的意义.方法 将体外培养HKCs细胞随机分为3组:(1)对照(C)组:无血清培养基(FSM)培养;(2)TGFβ1培养(T)组:分别用含不同浓度的TGFβ1(T5组:5 ng/ml
【机 构】
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成都军区昆明总院肾内科,云南,昆明,650032,南京军区福州总院肾内科,第三军医大学新桥医院肾内科
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目的 探讨不同浓度重组人转化生长因子β1(rhTGFβ1)诱导入近端肾小管上皮细胞(HKCs cells)发生小管上皮-间充质转分化(TEMT)过程中桩蛋白(Pax)的表达及金雀异黄素(Gen)干预来探讨Pax在此过程中的意义.方法 将体外培养HKCs细胞随机分为3组:(1)对照(C)组:无血清培养基(FSM)培养;(2)TGFβ1培养(T)组:分别用含不同浓度的TGFβ1(T5组:5 ng/ml,T10组:10 ng/m1)的FSM培养;(3)T+G组:TGFβ1 10 ng/ml+Gen 50 μmol/L共同培养.48 h后用半定量逆转录多聚酶链式反应(RTPCR)或免疫组化方法检测HKCs细胞E-cadherin、alpha-smooth muscle(α-SMA)和Pax的mRNA或蛋白表达;Western blot分析Pax蛋白表达变化.结果 (1)C组:E-cadherin大量表达,αSMA表达阴性,Pax有基础的表达;(2)T组:E-cadherin表达减少,αSMA及Pax表达增加较C组差异均有统计学意义(P＜0.01),且T10组较T5组差异有统计学意义(P＜0.01).(3)T+G组:E-cadherin表达减少及αSMA和Pax表达增加较T10组差异均有统计学意义(P＜0.01),较C组差异有统计学意义(P＜0.01).结论 TGFβ1启动并介导HKCs细胞发生TEMT过程中能呈剂量依赖性诱导Pax表达增加;Pax参与TGFβ1诱导的TEMT部分是通过酪氨酸激酶(PTK)途径进行信号转导。
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