雅致放射毛霉羧肽酶Y在毕赤酵母中的高效分泌表达

• 作 者: 张欢欢 陈昶旭 刘中美 周哲敏
• 机 构: 江南大学生物工程学院
• 出 处: 食品与发酵工业
• 发表日期: 2018年11期
• 关键词: 羧肽酶Y 毕赤酵母 共表达 高效分泌表达 carboxypeptidase Y Pichia Pastoris co-expression high level
• 基金项目: 国家重点研发计划政府间国际科技创新合作重点专项(2016YFE0127400),国家自然科学基金青年科学基金项目(31400078)

分别构建以2种启动子表达雅致放射毛霉羧肽酶Y的重组毕赤酵母菌株GS115,通过提高抗生素浓度筛选到具有不同拷贝数羧肽酶Y基因的重组菌株,通过对蛋白表达量的比较筛选出高效分泌表达菌株。在筛选得到的重组菌株中共表达伴侣蛋白binding protein(BIP)、protein disulfide isomerase(PDI)、endoplasmic oxidoreductin 1(ERO1),分别将羧肽酶Y酶原的分泌表达量提高到1.87倍、1.72倍和1.26倍。体外羧肽酶Y酶原可以由胰蛋白酶激活。该研究实