【摘 要】
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目的获得人甘露聚糖结合凝集素(MBL)相关丝氨酸蛋白酶-1(MASP-1)基因.方法以人胎肝组织总RNA为模板,采用RT-PCR获取目的cDNA片段,克隆入pGEM-T载体,进行酶切图谱分析和测序鉴
【机 构】
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第一军医大学免疫学教研室广东广州 510515
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目的获得人甘露聚糖结合凝集素(MBL)相关丝氨酸蛋白酶-1(MASP-1)基因.方法以人胎肝组织总RNA为模板,采用RT-PCR获取目的cDNA片段,克隆入pGEM-T载体,进行酶切图谱分析和测序鉴定.结果以RT-PCR方法获得了含信号顺序的全长MASP-1 cDNA,将其与pGEM-T载体连接,转化大肠杆菌TG1,建立了MASP-1的cDNA克隆.酶切图谱与微机分析结果一致.序列分析表明,与GenBank中的人MASP-1 cDNA比较,仅1个位置的核苷酸不同,其编码产物是19个氨基酸残基的信号顺序和680个氨基酸残基的MASP-1蛋白.结论成功克隆了人MASP-1的cDNA,为深入研究补体凝集素途径的激活机制和MBL基因突变所致免疫缺损的机制奠定了基础.
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