多房棘球绦虫原头节cDNA表达文库的构建及初步鉴定

来源 :中华医学杂志 | 被引量 : 0次 | 上传用户:liaotianeryi2
下载到本地 , 更方便阅读
声明 : 本文档内容版权归属内容提供方 , 如果您对本文有版权争议 , 可与客服联系进行内容授权或下架
论文部分内容阅读
目的 构建中国分离株多房棘球绦虫原头节cDNA表达文库。方法 mRNA的提取采用Quicprep MicromRNA purification kit并做适当改进,主要利用异硫氰酸胍的破坏和保护双重作用及oligo(dT)-纤维素柱层析来提取、纯化mRNA。以约1.8 μg的mRNA为模板、六聚体随机引物逆转录,再用衔接头EcoRI/NotI修饰逆转录所得的cDNA钝端以使其两端形成粘性EcoRI位点,然后克隆入噬菌体λgtll的EcoRI臂,体外包装后转染大肠杆菌Y1090,蓝白斑筛选重组体,PCR鉴定插入片段大小。结果 重组率几乎100%;库容量约1×106,插入片段长为1.47 Kb。结论 已成功构建中国分离株多房棘球绦虫原头节cDNA表达文库,可进行进一步的深入研究。
其他文献
AIM To analyze the association of HCV-RNA with peripheral blood mononuclear cells (PBMC)and to answer the question whether HCV-RNA positivity in PBMC is due to
Aim: In order to reveal the histochemical alteration that might occur during the processes of the spermatogenic dis mption induced by testicular capsulotomy, th
目的 探索非完全性脊髓损伤(discomplete SCI)的直接电生理证据以及4-氨基吡啶(4-AP)的影响。 方法 采用Allen's打击模型造成T8-T9脊髓不同程度损伤(空白组35 gcf损伤组70 gcf
目的 对离体豚鼠心肌细胞予以短时间的低氧建立细胞预处理模型,并以此判定ATP敏感性钾通道是否参与此缺氧(模拟缺血)的预处理。方法 从成年豚鼠的心室分离出单个心肌细胞,进行
目的 探索升主动脉缩窄引起的大鼠左心室肥厚(LVH)和充血性心衰(CHF)心肌收缩张力发展速率低抑的分子机制。方法 采用左心室乳头肌测定张力发展最大速率(+dT/dtmax);采用Nor
INTRODUCTIONThe spectrum of acute pancreatitis (AP) ranges from a mild spontaneously resolved disorder to severe disease with mortality up to 20%-48.4%[1-3].
INTRODUCTIONAcute narcotizing pancreatitis usually takes a severe clinical course and is associated with multiple organ dysfunction .With the further understand
目的 探讨激素替代治疗中孕激素的加用方式。方法 以去势后SD雌性大鼠作为动物模型,以核分裂率与增殖细胞核抗原指数作为指标,模拟临床激素替代疗法中两种孕激素的加用方式-连
本文论述了一种非接触眼压眼后测定仪的测量原理和仪器结构,并提供了一组实验结果。表明了该仪器具有测量准确、操作简便、自动化程度高、使用时患者无痛感、不易引起交叉感染
目的 探讨准分子激光角膜切削术(photorefractive keratectomy, PRK)后肌性视疲劳与切削偏心的关系。方法 对8例16眼近视性屈光不正行PRK后随防6-14个月,视力均在0.8以上且