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本研究建立了秦艽药材中龙胆苦苷(GPS)和落干酸(LA)的含量测定及其HPLC指纹图谱分析方法.该方法采用Zorbax SB-C18柱(250 mm×4.6 mm,5μm),0.04%磷酸水(A)-乙腈(B)为流动相梯度洗脱,检测波长为230 nm,流速为1.0 mL/min.利用L9(34)正交试验确定药材的最佳提取工艺为:每份秦艽样品(g)中加入15倍量的50%乙醇(mL),超声提取30分钟.定量分析结果表明秦艽生药中龙胆苦苷的含量(14.05 mg/g-74.61 mg/g)明显高于落干酸(1.13 mg/g-40.46 mg/g)的含量.根据样品中龙胆苦苷和落干酸含量的比值(1.8-11.4)可将大叶秦艽(GPS-LA的比值≤4.3)与细梗秦艽(含小秦艽,GPS-LA的比值≥4.8)进行区分.秦艽生药HPLC指纹图谱的主成分聚类分析结果也显示大叶秦艽与细梗秦艽(含小秦艽)可被分为两个不同的类群.本文所建立的HPLC-DAD分析方法对于秦艽生药的品种鉴定和质量控制具有指导意义和参考价值.