反义RNA抑制人视网膜色素上皮细胞VEGF分泌的研究

• 作 者: 樊莹 许迅 王丰 张皙 黄倩
• 机 构: 上海市第一人民医院眼科,上海市第一人民医院中心实验室,
• 出 处: 中华实验眼科杂志
• 发表日期: 2003年21期
• 关键词: 色素上皮 生长因子 内皮 血管 基因转移 pigment epitheliumgrowth factorsendotheliumvasculargene tra

目的探索应用血管内皮生长因子(VEGF121)的反义RNA抑制人视网膜色素上皮细胞(RPE)VEGF表达的可行性.方法构建编码反义hVEGF121真核表达质粒,转入人RPE细胞.将稳定表达外源基因的细胞分别置于大气氧环境(21%O2)或缺氧环境(1%O2)中培养,以空白细胞为对照,18h后收集上清液,ELISA测定其中VEGF的浓度,将此上清液加入人脐静脉血管内皮细胞(HUVEC),观察其对细胞生长的影响.结果反义VEGF转染能使RPE细胞VEGF的分泌量降低62.7%.缺氧条件下,RPE细胞大量分泌VEGF,18h时细胞培养上清液能刺激HUVEC细胞增殖18.4%(P<0.01).同样状态下,转染反义VEGF的RPE细胞培养上清液则无明显促内皮细胞生长作用(P>0.01).结论本实验构建的反义VEGF121质粒能通过下调RPE细胞VEGF的蛋白分泌水平,有效抑制缺氧情况下该细胞上清液对血管内皮细胞的生长刺激作用.