【摘 要】
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目的:简化Northern印迹的操作步骤,建立安全无毒的RNA凝胶电泳方法.方法:RNA经变性处理后在不含任何化学物质的中性琼脂糖凝胶上电泳,然后用0.05mol/L NaOH溶液转印3h至转印
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目的:简化Northern印迹的操作步骤,建立安全无毒的RNA凝胶电泳方法.方法:RNA经变性处理后在不含任何化学物质的中性琼脂糖凝胶上电泳,然后用0.05mol/L NaOH溶液转印3h至转印膜上,相继与特异核酸探针杂交,检测不同表达丰度的基因,放射自显影成像.结果:凝胶电泳图显示清晰的28S和18S rRNA条带;Nothern杂交检测出低丰度表达基因.结论:改良的Northern印迹法能够达到传统方法有效变性、分离、检测特异基因表达的效果,垂直凝胶电泳可检测低至5ng的RNA.
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