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【摘 要】目的:采用HPLC法对青六散中主要成分甘草酸铵进行含量测定。方法:采用HPLC法测定。色谱柱为Agilent ZORBAX SB- 18(4.6×250mm;5.0μm);流动相为甲醇—0.2mol/L醋酸铵－冰醋酸(67:33:1);流速l.0mL﹒min-1;检测波长250nm;温度25℃。结果:甘草酸铵在0.05μg～2.0μg(r=0.999)范围内,呈良好的线性关系。甘草酸铵平均加样回收率为97.01%,RSD=1.59(n=9)。结论:此方法简单、快速、准确,可用于青六散中甘草酸铵含量测定。
【关键词】青六散 甘草酸铵 高效液相色谱法
【中图分类号】R 【文献标识码】A 【文章编号】1009-9646(2008)06-0180-01
青六散是由青六散由滑石、甘草、红曲(炒)组成,化温热,利小便。临床上常用于湿热泄泻,小便短赤等。尚未见报道对青六散中的甘草酸铵进行含量测定。我们采用高效液相色谱法,以甲醇—0.2mol/L醋酸铵－冰醋酸(67:33:1)为流动相[1],测定青六散中的主要成分甘草酸铵的含量。
1 材料与方法
1.1 仪器与试药Agilent--1100液相色谱仪;甘草酸铵对照品(中国药品生物制品检定所,纯度均在98%以上,供含量测定用,100081－200406);甲醇色谱纯,其余为分析纯;青六散(上海雷允上药业有限公司)
1.2 色谱条件 流动相:甲醇—0.2mol/L醋酸铵－冰醋酸(67:33:1,V/V/V);色谱柱:Agilent ZORBAX SB- 18(4.6×250mm;5.0μm);检测波长:250nm;流速:1.0mL·min-1;温度:25℃
1.3 溶液的制备
1.3.1 对照品溶液 取甘草酸铵对照品,加流动相制成每1ml含0.2mg的溶液,作为对照品溶液。
1.3.2 供试品溶液的制备 取本品1g,精密称定,置25ml容量瓶中,加入流动相20ml,超声40分钟,放冷,用流动相定容至刻度,摇匀,滤过,取续滤液,即得。
1.3.3 阴性样品的制备 取阴性样品1g,按供试品溶液的制备方法制备作为空白溶液。
2 色谱结果
2.1 专属性 取上述溶液在HPLC分离条件下测定,进样量对照品、样品、阴性样品各10?L,进行分析,样品图谱中甘草酸铵的色谱峰保留时间与对照品的色谱峰一致。阴性样品在此保留时间无吸收峰,阴性样品无干扰。
2.2 稳定性考察 取青六散样品,按供试品溶液制备项下的方法制备,按分离色谱条件于0、2、4、6、8h内测定, 结果甘草酸铵面积RSD为0.51%。结果表明:供试品溶液在0～8h内测定,基本稳定。
2.3 线性关系考察 精密称取甘草酸铵加流动相分别制成浓度为0.05mg/ml、0.108 mg/ml、0.2mg/ml、0.96mg/ml、1.55 mg/ml、1.9 mg/ml的对照品溶液;分别精密吸取各对照品溶液10μl注入液相色谱仪,记录峰面积。以进样量(μg)为横坐标,峰面积为纵坐标,绘制标准曲线(见下图),进行回归分析,结果表明甘草酸铵在0.05μg～2.0μg范围内线性关系均良好。
2.4 精密度试验 精密量取同一对照品溶液10μL,进样测定6次,结果:甘草酸铵的RSD为0.22%。
2.5 重复性试验 取青六散样品,平行6份,按供试品溶液制备项下的方法制备,按分离色谱条件测定,结果:甘草酸铵的平均含量为3.43mg﹒g-1, RSD为0.22%。
2.6 加样回收率试验 取青六散样品,精密加入对照品溶液适量,按供试品溶液制备项下的方法制备,按分离色谱条件测定,结果如表1。
3 结语
本实验曾经采用不同超声时间提取,结果超声40分钟提取完全,阴性无干扰,回收率达到要求。本实验采用的提取方法和色谱条件可很好控制青六散中甘草酸铵的质量,为该制剂的质量标准制定提供了依据和方法。
参考文献
[1] 黄熙,张莉.反相高效液相色谱法测定大鼠血浆中的甘草酸铵[J].药物分析杂志,2001,21(4):233-237.
【关键词】青六散 甘草酸铵 高效液相色谱法
【中图分类号】R 【文献标识码】A 【文章编号】1009-9646(2008)06-0180-01
青六散是由青六散由滑石、甘草、红曲(炒)组成,化温热,利小便。临床上常用于湿热泄泻,小便短赤等。尚未见报道对青六散中的甘草酸铵进行含量测定。我们采用高效液相色谱法,以甲醇—0.2mol/L醋酸铵－冰醋酸(67:33:1)为流动相[1],测定青六散中的主要成分甘草酸铵的含量。
1 材料与方法
1.1 仪器与试药Agilent--1100液相色谱仪;甘草酸铵对照品(中国药品生物制品检定所,纯度均在98%以上,供含量测定用,100081－200406);甲醇色谱纯,其余为分析纯;青六散(上海雷允上药业有限公司)
1.2 色谱条件 流动相:甲醇—0.2mol/L醋酸铵－冰醋酸(67:33:1,V/V/V);色谱柱:Agilent ZORBAX SB- 18(4.6×250mm;5.0μm);检测波长:250nm;流速:1.0mL·min-1;温度:25℃
1.3 溶液的制备
1.3.1 对照品溶液 取甘草酸铵对照品,加流动相制成每1ml含0.2mg的溶液,作为对照品溶液。
1.3.2 供试品溶液的制备 取本品1g,精密称定,置25ml容量瓶中,加入流动相20ml,超声40分钟,放冷,用流动相定容至刻度,摇匀,滤过,取续滤液,即得。
1.3.3 阴性样品的制备 取阴性样品1g,按供试品溶液的制备方法制备作为空白溶液。
2 色谱结果
2.1 专属性 取上述溶液在HPLC分离条件下测定,进样量对照品、样品、阴性样品各10?L,进行分析,样品图谱中甘草酸铵的色谱峰保留时间与对照品的色谱峰一致。阴性样品在此保留时间无吸收峰,阴性样品无干扰。
2.2 稳定性考察 取青六散样品,按供试品溶液制备项下的方法制备,按分离色谱条件于0、2、4、6、8h内测定, 结果甘草酸铵面积RSD为0.51%。结果表明:供试品溶液在0～8h内测定,基本稳定。
2.3 线性关系考察 精密称取甘草酸铵加流动相分别制成浓度为0.05mg/ml、0.108 mg/ml、0.2mg/ml、0.96mg/ml、1.55 mg/ml、1.9 mg/ml的对照品溶液;分别精密吸取各对照品溶液10μl注入液相色谱仪,记录峰面积。以进样量(μg)为横坐标,峰面积为纵坐标,绘制标准曲线(见下图),进行回归分析,结果表明甘草酸铵在0.05μg～2.0μg范围内线性关系均良好。
2.4 精密度试验 精密量取同一对照品溶液10μL,进样测定6次,结果:甘草酸铵的RSD为0.22%。
2.5 重复性试验 取青六散样品,平行6份,按供试品溶液制备项下的方法制备,按分离色谱条件测定,结果:甘草酸铵的平均含量为3.43mg﹒g-1, RSD为0.22%。
2.6 加样回收率试验 取青六散样品,精密加入对照品溶液适量,按供试品溶液制备项下的方法制备,按分离色谱条件测定,结果如表1。
3 结语
本实验曾经采用不同超声时间提取,结果超声40分钟提取完全,阴性无干扰,回收率达到要求。本实验采用的提取方法和色谱条件可很好控制青六散中甘草酸铵的质量,为该制剂的质量标准制定提供了依据和方法。
参考文献
[1] 黄熙,张莉.反相高效液相色谱法测定大鼠血浆中的甘草酸铵[J].药物分析杂志,2001,21(4):233-237.