hEGF和hbFGF的C端（78—154aa）融合蛋白的表达、纯化及活性测定

• 作 者: 余榕捷 张玲 林剑 谢秋玲 孙奋勇 蒲含林 李志英
• 机 构: 暨南大学生物工程研究所
• 出 处: 中国病理生理杂志
• 发表日期: 2002年4期
• 关键词: 表皮生长因子 尿抑胃素 成纤维细胞生长因子 碱性 重组融合蛋白类 大肠杆菌 HEGF Human Epidermal growth factor-urogas

目的:将人表皮生长因子(hEGF)与人碱性成纤维细胞生长因子(hbFGF)的C端连接,构建出既可与肝素结合,又具有促进细胞生长活性的融合蛋白,并在大肠杆菌中高效表达.方法: 将PCR扩增hEGF全基因与PCR扩增hbFGF 5端的231 bp的片段连接,克隆到表达载体pJN,构建出含融合基因的表达质粒pJRH.将pJRH转化BL21(DE3)表达菌株,获得融合蛋白的表达菌株pJRH(BL).Western blot检测表达产物免疫学活性.表达产物上肝素亲和柱和分子筛进行纯化.结果: 融合蛋白表达产量为3