【摘 要】
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目的 研究沉默信息调节因子2相关酶类7（silent information regulator 2 related enzyme 7,SIRT7）对低氧诱导的人肺动脉平滑肌细胞（human pulmonary artery smooth muscle cells, HPASMCs）增殖和迁移的调控作用，并探讨可能的分子作用机制。方法 体外培养HPASMCs建立低氧模型。通过慢病毒介导的短发卡RN
【基金项目】
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陕西省重点研发计划项目（2019SF-202）；
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目的 研究沉默信息调节因子2相关酶类7（silent information regulator 2 related enzyme 7,SIRT7）对低氧诱导的人肺动脉平滑肌细胞（human pulmonary artery smooth muscle cells, HPASMCs）增殖和迁移的调控作用，并探讨可能的分子作用机制。方法 体外培养HPASMCs建立低氧模型。通过慢病毒介导的短发卡RNA（short hairpin RNA,shRNA）干扰技术沉默SIRT7在HPASMCs中的表达。实验分为4组：常氧对照组、低氧组、低氧+LV-sh-Ctrl组和低氧+LV-sh-SIRT7组。低氧+LV-sh-Ctrl组HPASMCs感染对照重组腺病毒LV-sh-Ctrl,然后进行低氧处理。低氧+LV-sh-SIRT7组HPASMCs感染表达SIRT7 shRNA的重组腺病毒LV-sh-SIRT7,然后进行低氧处理。采用实时定量PCR（real-time quantitative PCR,RT-qPCR）检测SIRT7的mRNA表达水平。采用Western blotting检测SIRT7、转化生长因子-β1（transforming growth factor-β1,TGF-β1）、转化生长因子β受体Ⅰ（transforming growth factor-β receptorⅠ,TβRⅠ）、Smad2和Smad3的蛋白表达量。采用细胞计数试剂盒-8（cell counting kit-8,CCK-8）和5-乙炔基-2′-脱氧尿苷（5-ethynyl-2′-deoxyuridine, EdU）实验检测细胞增殖。采用流式细胞术检测细胞凋亡。采用Transwell实验检测细胞迁移。结果 与常氧对照组比较，低氧组和低氧+LV-sh-Ctrl组SIRT7表达水平显著升高（P＜0.01）,细胞增殖和迁移水平显著提高（P＜0.01）,细胞凋亡率显著降低（P＜0.05）;与低氧组和低氧+LV-sh-Ctrl组比较，低氧+LV-sh-SIRT7组SIRT7表达水平显著降低（P＜0.01）,细胞增殖和迁移水平显著下降（P＜0.01）,细胞凋亡率显著增加（P＜0.01）。与常氧对照组比较，低氧组和低氧+LV-sh-Ctrl组TGF-β1、TβRⅠ、p-Smad2和p-Smad3的蛋白表达量显著增加（P＜0.01）;与低氧组和低氧+LV-sh-Ctrl组比较，低氧+LV-sh-SIRT7组TGF-β1、TβRⅠ、p-Smad2和p-Smad3的蛋白表达量显著减少（P＜0.01）。结论 基因沉默SIRT7通过调控TGF-β1/Smad信号通路抑制缺氧诱导的HPASMCs增殖和迁移。
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