【摘 要】
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目的:克隆转录增强因子-1(transcription enhancer factor-1,TEF-1)相关基因(related TEF-1,RTEF-1),检测鸡发育过程RTEF-1基因的表达及组织分布.方法:从13 d鸡胚骨骼肌mRNAs
【机 构】
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北京大学基础医学院生物化学与分子生物学系,
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目的:克隆转录增强因子-1(transcription enhancer factor-1,TEF-1)相关基因(related TEF-1,RTEF-1),检测鸡发育过程RTEF-1基因的表达及组织分布.方法:从13 d鸡胚骨骼肌mRNAs经RT-PCR方法扩增RTEF-1的编码序列(cDNA),将其克隆到pGEM和pUC载体并进行核苷酸序列分析.采用RT-PCR技术检测鸡胚发育第9天至雏鸡孵出后6周的骨骼肌组织中RTEF-1基因的表达,并测试其在13 d鸡胚和出生后1 d雏鸡的骨骼肌、心肌、脑、肝和胗等5种组织中的存在.结果:克隆序列分析结合GenBank检索表明,所克隆的cDNA片段(900 bp)与cTEF-1A序列仅相差两个碱基.应用RT-PCR技术在鸡胚发育9 d至出生后6周雏鸡的骨骼肌组织均检出了RTEF-1基因的表达;13 d鸡胚和出生后1 d雏鸡的骨骼肌、心肌、脑、肝和胗等5种组织中均有TEF-1相关基因的转录.结论:克隆的cDNA片段属多种组织普遍存在的cTEF-1A.与先前检测的M-CAT结合因子发生规律(在两周前表达)不同,cTEF-1A在鸡胚发育的第9天至出生后6周的骨骼肌组织持续表达.
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