腺病毒介导的shRNA下调GLP-1R表达对小鼠内皮祖细胞功能的影响及机制研究

• 作 者: 黄小川 涂强 帅青云 付杰 谢华强 张琰 曹政
• 机 构: 湖北医药学院,十堰市太和医院
• 出 处: 中西医结合心脑血管病杂志
• 发表日期: 2021年11期
• 关键词: 内皮祖细胞 胰高血糖素样肽-1受体 AKT/eNOS信号通路 细胞衰老 实验研究
• 基金项目: 2017年国家自然科学基金面上项目(No.81771522),2019年湖北省教育厅指导性项目(No.B2019111)。

目的探讨腺病毒介导的shRNA下调胰高血糖素样肽-1受体(GLP-1R)基因表达对小鼠骨髓来源的内皮祖细胞(EPCs)迁移、黏附、衰老的影响及其可能机制。方法采用密度梯度离心法分离并培养小鼠骨髓EPCs,以腺病毒为载体将靶向GLP-1R的shRNA干扰重组体转染至体外培养的EPCs;实时荧光定量聚合酶链式反应(RT-qPCR)及免疫印迹法(Western Blot)验证GLP-1R基因表达下调。利用Transwell小室检测EPCs迁移能力,黏附实验检测其黏附能力,β-半乳糖苷酶染色检测细胞衰老,West