【摘 要】
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目的:研究TGF-β1对肺癌干细胞和非干细胞增殖的影响,为深入研究肺癌干细胞增殖与分化的分子调控机制奠定基础。方法:利用无血清培养基从人大细胞肺癌组织中分离、培养肿瘤细
【机 构】
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河南省肿瘤医院生物治疗科,河南省肿瘤医院血液科,奥斯陆大学国立肿瘤医院细胞治疗科,奥斯陆大学国立肿瘤医院免疫科,
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目的:研究TGF-β1对肺癌干细胞和非干细胞增殖的影响,为深入研究肺癌干细胞增殖与分化的分子调控机制奠定基础。方法:利用无血清培养基从人大细胞肺癌组织中分离、培养肿瘤细胞,并建立大细胞肺癌细胞系。以流式细胞术分选表达CD44和(或)CD90的肺癌细胞亚群,通过细胞球形成实验及X射线敏感实验鉴定分选的肺癌干细胞。用流式细胞术及细胞增殖抑制实验检测TGF-β1对肺癌干细胞生长的影响。结果:成功地培养出高纯度的原代大细胞肺癌细胞,其传代次数可达30代以上。应用CD44和CD90共同标记,可将大细胞肺癌细胞分为4亚群,分别是CD44+CD90+、CD44+CD90-、CD44++CD90+和CD44++CD90-细胞,其中CD44++CD90+细胞比例为0.4%。相比于其他细胞亚群,有较多的CD44++CD90+细胞为间质细胞样形态,它们形成细胞球的能力最强,对X射线照射的抵抗力也最强。TGF-β1能抑制肺癌细胞的增殖,并促使它们向间质细胞样形态转化。TGF-β1可抑制各亚群肺癌细胞的增殖,但对CD44++CD90+细胞的抑制能力最弱,而对CD44+CD90-细胞的抑制能力最强;培养体系中加入TGF-β1后CD44++CD90+细胞的比例逐步升高,去除TGF-β1后CD44++CD90+细胞的比例又逐渐降低。结论:CD44++CD90+细胞可能是大细胞肺癌的干细胞,TGF-β1能显著抑制肺癌非干细胞的增殖,从而相应地富集了肺癌干细胞。
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