【摘 要】
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目的 观察用免疫抑制剂FK506对干扰素(IFN)-γ和肿瘤坏死因子(TNF)-α诱导的间充质干细胞(MSCs)免疫抑制功能的影响及其作用机制.方法 将经过不同炎症因子预处理的小鼠MSCs与脾细胞共培养,并在FK506作用72 h后,以噻唑蓝(MTT)比色法检测脾细胞增殖;以流式细胞术检测脾细胞凋亡;以实时定量聚合酶链反应(Real-time PCR)法检测MSCs发挥免疫抑制作用的主要分子,观察
【机 构】
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目的 观察用免疫抑制剂FK506对干扰素(IFN)-γ和肿瘤坏死因子(TNF)-α诱导的间充质干细胞(MSCs)免疫抑制功能的影响及其作用机制.方法 将经过不同炎症因子预处理的小鼠MSCs与脾细胞共培养,并在FK506作用72 h后,以噻唑蓝(MTT)比色法检测脾细胞增殖;以流式细胞术检测脾细胞凋亡;以实时定量聚合酶链反应(Real-time PCR)法检测MSCs发挥免疫抑制作用的主要分子,观察FK506对其影响.结果 IFN-γ和TNF-α联合预处理后的MSCs可以显著抑制脾细胞增殖,促进脾细胞凋亡,凋亡率可达(53.5±2.5)%,明显高于IFN-γ或TNF-α预处理的MSCs组以及对照组(P＜0.05),并且IFN-γ和TNF-α仅可以显著上调MSCs中诱导型一氧化氮合酶(iNOS)的表达,MSCs的免疫抑制作用可以被iNOS特异性抑制剂1400W所拮抗;但FK506则可以抑制MSCs中iNOS的表达,使MSCs对脾细胞增殖的抑制作用显著降低,脾细胞凋亡减少,凋亡率降至(44.3±3.2)%(P＜0.05).结论 FK506通过抑制IFN-γ和TNF-α联合预处理的MSCs中iNOS表达从而抑制其免疫抑制功能。
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