高氧暴露新生大鼠肺组织转录因子CASZ1的表达及其与肺微血管发育的关系

• 作 者: 崔换金 黄为民 何嘉裕
• 机 构: 510515 广州，南方医科大学南方医院新生儿科,510515 广州，南方医科大学南方医院新生儿科,510515 广州，南方医科大学南方医院新生儿科,
• 出 处: 中华儿科杂志
• 发表日期: 2016年54期
• 关键词: 转录因子 支气管肺发育不良 高氧症 微血管密度

目的

探讨转录因子CASZ1在高氧致支气管肺发育不良新生大鼠肺组织中的表达及其对肺微血管发育的关系。

方法

足月新生Sprague Dawley(SD)大鼠48只，雌雄不限，在出生24 h内按随机数字法分为实验组和对照组，每组24只。实验组暴露于高氧[吸入氧浓度(FiO₂)：0.80±0.02]氧箱中，对照组置于空气中(FiO₂：0.21)。两组分别于实验开始后3、7和14 d随机数字法选取8只处死并取出肺组织。HE染色光镜下观察其肺组织形态结构改变，采用放射状肺泡计数(RAC)和呼吸膜厚度来评价肺泡发育情况；免疫组织化学方法检测CD31的表达并计算肺微血管密度；免疫组织化学、Western印迹、实时荧光定量PCR检测肺组织CASZ1定位、分布及表达。

结果

HE染色显示：实验组大鼠随着日龄的增加肺泡出现融合断裂、呼吸膜增厚、RAC明显少于对照组[14 d：呼吸膜厚度(12.69±0.63)/μm比(6.53±0.16)μm，RAC(5.9±0.4)个比(8.4±1.0)个，t＝19.046、4.760，P均＝0.000]。免疫组织化学显示：CD31蛋白主要表达于肺微血管内皮细胞中，实验组3、7、14 d CD31阳性细胞的平均积分光密度值均明显低于对照组[(16.6±1.6)×10³比(40.1±2.4)×10³、(18.1±1.4)×10³比(83.2±5.2)×10³，(49.2±5.4)×10³比(136.2±28.1)×10³，t＝16.185、16.066、6.078，P均<0.01]；肺微血管密度也显著低于对照组[(3.84±0.15)%比(6.01±0.22)%，(4.17±0.38)%比(6.15±0.24)%，(5.43±0.44)%比(9.13±0.25)%，t＝16.124、8.773、14.076，P均<0.01]。实时荧光定量PCR及Western印迹结果显示：各时间点实验组新生大鼠肺组织CASZ1 mRNA水平均显著低于对照组(0.56±0.17比1.00±0.26、0.32±0.29比0.58±0.14、0.4±0.22比0.56±0.15，t＝3.890、3.303、2.388，P均<0.05)；CASZ1蛋白表达水平也均明显低于对照组(0.65±0.02比0.78±0.23、0.46±0.03比0.75±0.05、0.34±0.22比0.75±0.04，t＝6.200、10.485、14.998，P均<0.05)。实验组CASZ1蛋白表达水平与肺微血管密度成显著正相关(r＝0.519、P<0.01)。

结论

CASZ1参与了新生大鼠支气管肺发育不良发生发展，且与其肺微血管发育障碍密切相关。