胚胎肝细胞提取液体外诱导骨髓干细胞向肝系细胞分化的实验研究

来源 :湖北省中医中药学会肝病专业委员会第三次学术会议 | 被引量 : 0次 | 上传用户:green7116xxxx
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  目的:探讨胚胎肝细胞提取液体外诱导骨髓干细胞向肝系细胞分化的可行性。方法:通过密度梯度分离法分离出大鼠骨髓中单个核细胞,进行体外培养和鉴定。在(BMSCs)传代培养7天后,把培养细胞分为诱导组和非诱导组;诱导组加入大鼠胚胎肝细胞提取液的培养体系,非诱导组加入不含大鼠胚胎肝细胞提取液的基础培养体系。在诱导培养第0天,10天,20天,30天,40天对诱导分化的细胞进行形态学观察及肝系细胞特异性标志物的鉴定。结果:①形态学:诱导培养2周后,长梭形细胞大多数转变成圆形、卵圆形及多角形,细胞呈肝干细胞样圆形。②免疫细胞化学检测:诱导培养第10~20天细胞表达AFP、cKl9逐渐增强,第30~40天逐渐减弱;诱导培养第10~40天细胞表达ALB呈上升趋势;阳性染色细胞胞浆内出现棕黄色颗粒。非诱导组细胞不表达甲胎蛋白(AFP)、细胞角蛋白19(CKl9)、白蛋白(ALB)3种蛋白,为阴性染色。③糖原染色:诱导培养的细胞第10~40天BMscs均有糖原表达,非诱导细胞未见糖原表达(P<0.05)。结论:胚胎肝细胞提取液在体外可以诱导骨髓干细胞向系细胞分化,并分化为具有合成、代谢、分泌及储存功能的肝系细胞。
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