胃癌高表达基因erk的PCR扩增,克隆和鉴定

来源 :第四军医大学学报 | 被引量 : 0次 | 上传用户:caoshaohua2009
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对在胃癌高表达的EPH家族基因erk胞外的配体结合区基因扩增及克隆.方法:从胃癌患者手术切除标本中提取RNA,反转录为cDNA,以计算机辅助分析设计并合成引物进行RT-PCR,并将扩增片段克隆入pUC19质粒,用酶切及PCR方法筛选鉴定阳性克隆.结果:RT-PCR扩增片段与设计相符,且特异性好,无非特异产物出现,表明所设计引物符合要求.酶切及巢式PCR、PCR-RFLP方法证明克隆片段正确插入pUC19的HindIII和BamHI位点,并将重组克隆命名为pGE42.结论;克隆的完成为进一步研究该基因在胃癌
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