【摘 要】
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目的建立人心脏瓣膜间质细胞体外钙化模型，并观察人骨形态发生蛋白2(BMP-2)在心脏瓣膜间质细胞钙化中的作用。方法体外培养人心脏瓣膜间质细胞后，将其分为2组：对照组在常规培养基础上，加用重组型人BMP-2蛋白；实验组在常规培养基础上加用钙化诱导剂，包括重组型人BMP-2蛋白、β甘油磷酸、L抗坏血酸和地塞米松。两组细胞均培养14 d，分别进行Von Kossa染色，并观察细胞钙化情况，建立心脏瓣膜间
【机 构】
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214044 安徽医科大学无锡临床学院,214044 安徽医科大学无锡临床学院,214044 安徽医科大学无锡临床学院,江苏大学免疫学研究所免疫学教研室,解放军第一〇一医院心血管内科,
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目的建立人心脏瓣膜间质细胞体外钙化模型，并观察人骨形态发生蛋白2(BMP-2)在心脏瓣膜间质细胞钙化中的作用。
方法体外培养人心脏瓣膜间质细胞后，将其分为2组：对照组在常规培养基础上，加用重组型人BMP-2蛋白；实验组在常规培养基础上加用钙化诱导剂，包括重组型人BMP-2蛋白、β甘油磷酸、L抗坏血酸和地塞米松。两组细胞均培养14 d，分别进行Von Kossa染色，并观察细胞钙化情况，建立心脏瓣膜间质细胞体外钙化模型。采用Western blot法检测两组细胞中细胞间黏附分子1、白细胞介素8、BMP-2和BMP-4的表达；采用ELISA法测定两组细胞分泌的BMP-2蛋白含量。
结果对照组细胞结构清晰，呈梭形放射状生长，Von Kossa染色阴性；实验组细胞核颜色变深，可见颗粒状沉积物分布在细胞周围，Von Kossa染色阳性，可见钙化的细胞形成结节。实验组细胞中的细胞间黏附分子1、白细胞介素8、BMP-2和BMP-4表达均高于对照组(P均<0.05)。细胞培养液上清中的BMP-2水平实验组为(92.5±4.9) pg/ml，对照组为(22.2±1.9) pg/ml，差异有统计学意义(P<0.05)。
结论采用重组型人BMP-2、β甘油磷酸、L抗坏血酸和地塞米松可诱导体外培养的瓣膜间质细胞钙化，并发生炎症反应，其BMP-2的表达以及分泌均增加。
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